ホヤ胚の表皮細胞分化を決定する転写制御因子の解析

决定海鞘胚胎表皮细胞分化的转录调节因子分析

• 批准号: 03254204
• 负责人: 佐藤 矩行
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03254204/
• 关键词: 細胞分化; 表皮細胞; 特異的遺伝子; 分化決定因子; 転写制御因子; 卵核胞; モノクロ-ナル抗体

ホヤのオタマジャクシ幼生の発生にともなって、正確に800個の表皮細胞が分化する。その細胞系譜は完全に解明されており、また予定表皮細胞は高い自律分化能を保待していることから、ホヤ胚の表皮細胞分化は内在的遺伝子プログラムにそった分化決定機構を分子生物学的に解析するための優れた研究系と考えらる。そこで、表皮特異的遺伝子の解析および内在的細胞質因子の解析を通してこの問題にアプロ-チした。1.表皮細胞特異的遺伝子の単離:卵割を連続的に阻害されたマボヤの受精卵は表皮細胞の分化形質のみを発現することが知られていた。そこで卵割阻害受精卵のcDNAライブラリ-を作り、受精卵cDNAプロ-ブとのディファレンシィアル・スクリ-ニングより卵割阻害受精卵特異的cDNAクロ-ンを20個得た。これを解析したところ少くとも8個は正常胚の表皮細胞にのみ特異的に発現する遺伝子に相当するものであることが分かった。さらにこれら8つの遺伝子の時間発現パタ-ンを調べたところ、(1)嚢胚期に発現し変態とともに停止する、(2)嚢胚期に発現し変態後も発現し続ける、(3)未受精卵からわずかに転写産物が存在し嚢胚期に転写産物は急激に増加し変態後消失する、(4)未受精卵から存在し嚢胚期に増加し変態後も存続する、の4つのパタ-ンに分けられることがわかった。現在これら8つのcDNAの塩基配列の決定を急ぐとともに、ゲノムDNA単離の準備を進めている。2.内在的因子の解析:表皮細胞分化の決定に関わる因子と卵核胞物質との関係が示唆されている。そこで卵核胞物質に対するモノクロ-ナル抗体を作製したところ、3つの抗体クロ-ンが得られた。その中の一つのcDNAを単離・解析したところ、N1と呼ばれるヒストン結合能をもった核タンパク質であることがわかった。現在さらに抗体のレパ-トリ-を広げるべく研究を続けている。

800 epidermal cells were correctly differentiated during the development of the embryo. Cell genealogy is fully understood, and the ability to maintain a high level of spontaneous differentiation of embryonic epidermal cells is determined. Molecular biological analysis of the mechanisms determining differentiation of embryonic epidermal cells is conducted. Analysis of epidermal specific genes and analysis of intrinsic cytoplasmic factors 1. Epidermal cell-specific differentiation: inhibition of egg cleavage and differentiation of epidermal cells 20 cDNA fragments specific to oocyte were obtained. The analysis of 8 different embryonic epidermal cells showed that the embryonic cells were different. 8. The time of occurrence of the embryo is adjusted;(1) the embryo appears and stops;(2) the embryo appears and stops;(3) the unfertilized egg exists and the unfertilized egg product increases rapidly and disappears;(4) the unfertilized egg exists and increases after the embryo appears and stops; 4. Now we need to prepare for the DNA sequencing of the 8-mer cDNA. 2. Analysis of intrinsic factors: factors related to epidermal cell differentiation and the relationship between egg nucleus and cell mass. In this case, the egg cell material is not available for antibody production. The cDNA in one of the cells can be separated and analyzed separately, and the binding energy of N1 and N1 can be used to determine the core quality. Now, the antibody is released.

项目成果

Ueki,Tatsuya: "Isolation of cDNA clones for epidermisーspecific genes of the ascidian embryo" Develop.Growth Differ.33. 579-586 (1991)

Ueki, Tatsuya：“海鞘胚胎表皮特异性基因的 cDNA 克隆的分离”Develop.Growth Differ.33 (1991)。

Ueki,Tatsuya: "Specific genes with different temporal expression patterns are associated with epidermal cell differentiation of the ascidian embryo" Devlop.Biol.

Ueki，Tatsuya：“具有不同时间表达模式的特定基因与海鞘胚胎的表皮细胞分化相关”Devlop.Biol。

Satoh,Noriyuki: "A complete autonomy in epidermisーspecific gene expression in the ascidian embryo" Development.

Satoh, Noriyuki：“海鞘胚胎中表皮特异性基因表达的完全自主性”开发。