ステロイド生合成システムにおける膜酵素反応速度論

类固醇生物合成系统中的膜酶动力学

基本信息

批准号：
06240238
负责人：
小南思郎
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

副腎皮質のミトコンドリアの内膜から調製された亜ミトコンドリア粒子(smp)にリポソーム膜を加えるとコレステロールの代謝活性が約1/4に低下することを発見した。この原因としてコレステロールあるいはコレステロールを代謝するP450(SCC)がリポソーム膜へ移動する可能性が考えられた。smpとリポソームを混合して一定時間静置後、卓上超遠心機を用いリポソームをsmpから分離した。分離されたリポソームにはコレステロールは検出されなかったが、P450(SCC)は移動してきていた。膜に深く組み込まれているP450(SCC)が他の膜系に動くという事実は膜タンパク質としては非常に珍しい。この実験結果はP450(SCC)は同じ膜中に存在するコレステロールしか代謝できないことも証明している。また、このP450(SCC)の移動速度に与えるリポソーム濃度とsmp濃度の影響から、P450(SCC)はまずsmp膜から解離し,水溶液中をリポソーム膜まで分散して行きリポソーム膜に組み込まれることが明らかになった。この過程ではP450(SCC)がsmp膜から解離する段階が律速になっていることも明らかになった。ステロイドホルモン生合成におけるステロイド中間体の膜間移動機構を調べるためミトコンドリアとミクロソームの混合液と、ステロイドホルモン代謝に関与するすべての膜酵素を含むリポソーム膜との反応を比較したところ、それらの反応にはほとんど差異が認められず、細胞内小器官膜内にはステロイド中間体移動に対する特別な機関を持っていないことが明かとなった。

我们发现，从肾上腺皮质的线粒体内膜制备的脂质体颗粒（SMP）中添加脂质体膜，可将胆固醇的代谢活性降低约1/4。这可能是由代谢胆固醇的胆固醇或P450（SCC）可能迁移到脂质体膜的可能性。混合SMP和脂质体后，将它们静置一段时间，使用桌面超级离心机将脂质体从SMP分离。在分离的脂质体中未检测到胆固醇，但P450（SCC）迁移。深层整合到膜中的P450（SCC）移动到其他膜系统的事实对于膜蛋白非常罕见。该实验的结果还表明，P450（SCC）只能代谢同一膜中存在的胆固醇。此外，脂质体浓度和SMP浓度对P450（SCC）运动速度的影响表明，P450（SCC）首先从SMP膜中解离，然后将水溶液分散到脂质体膜上，并将其掺入脂质体膜中。还可以揭示在此过程中，从SMP膜中解离P450（SCC）的步骤是限制速率的。为了研究类固醇中间体在类固醇激素生物合成中的膜间迁移机制，我们比较了线粒体和微体体与脂质体膜的混合物之间的反应，这些膜中含有所有膜酶，在这些反应中涉及的所有膜酶，并且在这些反应中几乎没有任何反应，并且在这些反应中几乎没有任何差异，而这些反应几乎没有局部性，并且在这些膜酶中几乎没有任何反应。中间迁移。