コラーゲン誘導関節炎の発症機序の解析とその制御の研究-T細胞の抗原認識レベルに於けるマニピュレーション

胶原性关节炎的发病机制分析及其控制研究——T细胞抗原识别水平的操控

• 批准号: 06265226
• 负责人: 垣本 毅一
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: University of Occupational and Environmental Health, Japan
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06265226/
• 关键词: ヒト慢性関節リウマチ; クラスIIMHC; RA susceptibility sequence(RASS); 抗RASS単クローン抗体; T細胞エピトープ; CB11; アナログペプチド; MHC・ペプチド療法

1)BB/DRラットのCA発症におけるRASSの役割コラーゲン誘導関節炎(CA)易発症性のBB/DRラットがそのクラスIIMHCのRTIDβ鎖のpolymorphic領域に有するRASS(ヒト慢性間節リウマチ(RA)患者に相関性が高いHLAハプロタイプに共通してみられる配列)の合成ペプチドを使って抗RASS単クローン抗体(KS-3)を作製した。このKS-3はII型コラーゲン(IIC)感作BB/DRラットのin vitroのIIC刺激による増殖反応を阻止し、フローサイトメトリーによってこのラットの膵臓細胞に結合性を有すると共に、この精製抗体100μgを1回IIC感作時に静注すると、BB/DRラットのCA発症を抑制する活性を有しており、このことから、本ラットにおけるCA発症においてRASSが抗原提示に使用されている可能性が強く示唆された。2)関節炎誘起性T細胞エピトープ(AE)についてDBA/1マウス由来T細胞クローンK-102は、IICのCNBγフラグメントCD11(アミノ酸278個)と反応する。CB11中にはT細胞エピトープが少なくとも5個存在するが、我々は20merの合成ペプチドとの反応性などから、CB11のN末端60〜81にK-102が認識するAEが少なくとも1つ存在することを明らかにした。さらにIIC60-81を構成するアミノ酸とI型コラーゲン(CA誘導性を欠く)のα1(I)鎖の対応する残基とが相似性が高くなるようにsite-directed substitutionを行ったアナログペプチドを4種類合成して調べたところ、そのうちの1つ、IIC60-81(S68、78、80)(IIC60-81の68P→V、78P→Aおよび80P→Aに置換)は、DBA/1マウス(H-2^q)の脾細胞を抗原提示細胞(APC)とし、K-102の増殖反応を指標としたcompetitive antigen presentation assayおよびwildペプチドのIIC60-81で免疫する際、このIIC60-81(S68、78、80)を加えて免疫すると、CAの発症が有意に抑制されることから、この合成ペプチドはAPCレベルでMHCアンタゴニストとして作用している可能性が強く示唆された。

1) BB/DR ラットのCA 発 syndrome におけるRASS の丳ラーゲン induced arthritis (CA) prone to rash SexのBB/DRラットがそのクラスIIMHCのRTIDβLOCKのpolymorphic domainにThere is a high correlation between patients with chronic interstitial rhinoplasty (RA) and HLA and HLA in common The synthetic anti-RAS anti-RAS antibody (KS-3) was produced by the synthetic antibody (KS-3).このKS-3はII type コラーゲン(IIC) sense BB/DRラットのin vitroのIIC stimulates and inhibits reproduction and reproduction 100 μg of Tono's purified antibody, which binds to Tono's cell-binding antibodies, is injected intravenously at the time of IIC infection.すると, BB/DR ラットのCA発 syndrome を suppresses するactivity を有しており, このことから, 本ラットにおけるCA disease においてRASSがantigen prompt に use されている possibility がstrong くshows instigation された. 2) Arthritis-inducing T-cell エピトープ(AE)についてDBA/1マウス T-cell クローンK-102は, IICのCNBγフラグメントCD11 (アミノ acid 278 pieces) and anti-bacterial. In CB11, there are 5 T-cells with fewer peptides, 20mers are synthesized, and the resistance is などから、CB11のN terminal 60~81にK-102がKnowledge するAEが小なくとも1つexistent することを明らかにした.さらにIIC60-81をConstitution of するアミノAcid type I コラーゲン (CA-induced をowed く) α1 (I) LOCK の対応 する residue と が similarity が 高 く な る よ う に site-directed substitutionを行ったアナログペプチドを4 types of synthesisして片べたところ、そのうちの1つ、IIC60-81(S68,78,80)(IIC60-81の68P→V , 78P→Aおよび80P→Aにreplacement)は、DBA/1マウス(H-2^q)のsplenocytesをantigen-prompting cells (APC)とし、K-102のproliferative reaction indexとしたcompetitive antigen presentation C assay A の発 syndrome が intentional suppression されることから、この综合ペプチドはAPCレベルでMHCアンタゴニストとして Effect しているPossibility がstrong くshows instigation された.