転写活性化因子PhoBの機能解析

转录激活子PhoB的功能分析

• 批准号: 06276211
• 负责人: 牧野 耕三
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06276211/
• 关键词: 転写活性化因子; PhoB; リン酸レギュロン; リン酸ボックス; RNAポリメラーゼ; σ^<70>サブユニット; DNA結合; PCR mutagenesis

大腸菌では倍地中のリン酸欠乏によりPhoBに依存して転写誘導のおこる31個以上の遺伝子群がありこれらは総称してリン酸レギュロンと呼ばれている。これら遺伝子群のプロモーター領域には転写活性化因子PhoBのDNA結合の認識配列であるリン酸ボックスが存在している。PhoBとRNAポリメラーゼの蛋白質・蛋白質の相互作用点を明らかにするためリン酸レギュロンの発現を特異的に減少させるRNAポリメラーゼ変異体の分離に成功した。その変異部位はRNAポリメラーゼのσ^<70>サブユニットのhelix-turn-helix上の第一helixにあり、この領域でPhoBとの蛋白質・蛋白質の相互作用に関与している可能性が高いことが示唆された。また、σ^<70>サブユニットの第一helixに部位特異的変異の導入を行い、この部位でのPhoBとの蛋白質・蛋白質の相互作用を確認した。さらに、PhoBとRNAポリメラーゼのリン酸レギュロンプロモーター上での蛋白質・蛋白質の相互作用をさらに明らかにするためにPCR mutagenesis法によりRNAポリメラーゼと相互作用できなくなったと考えられるPhoB変異体の分離を行なった。その部位がPhoB上のある特定領域に集中しているおり、この領域がRNAポリメラーゼとの相互作用点と考えられた。

Coliform bacteria have more than 31 genes that are dependent on the enzyme to induce acid deficiency. In the field of DNA binding, the activation factor PhoB is recognized as an active factor. The protein/protein interaction site of Photometry was identified and the protein/protein interaction site of Photometry was successfully isolated The <70>first helix on the helix-turn-helix has a high probability of being involved in the interaction between protein and protein. The <70>introduction of site-specific differences in the first helix and the confirmation of protein-protein interactions in the second helix The interaction between protein and protein in RNA and RNA was studied by PCR mutagenesis. The interaction points of RNA in specific areas of PhoB are concentrated.