SH3領域による分子認識の選択特異性を決める構造的要素の解明

阐明决定 SH3 区域分子识别选择性特异性的结构元件

• 批准号: 06276223
• 负责人: 松岡 耕二
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Institute of Gerontology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06276223/
• 关键词: 細胞内シグナル伝達; Src相同領域; SH3; Ash; Grb2; 低分子量GTP結合蛋白質

アダプター分子と総称されるAsh,Nck,Crkなどの連結分子は,細胞内シグナル伝達において鍵となる役割を果たしており,そのSH3領域に他の分子を結合することによって下流にシグナルを伝える.それぞれのSH3ドメインがどの分子にどのようなモチーフを認識して結合するのかを明らかにするため,まずわれわれは,Ashに焦点を絞り,GST融合蛋白質や免疫沈降法を用いて他の蛋白質との相互作用を調べた.その結果,Ras蛋白質に対するグアニンヌクレオチド交換因子であるSosのほかに,新規分子C3Gが発見され,またミクロチュブール結合性GTPaseであるダイナミンがAshに結合することが見出された.これらの結果から,AshのSH3の結合するモチーフの候補として,すでに知られていたmSosのEVPVPPPVPPR,PPESPPLLPPR,HSIAGPPVPPR,3BP1のRAPTMPPPLPPVPPQPAR,3BP2のPPAYPPPPVPなどに,ダイナミンのGPPPQVPSRPNRC,C3GのDPEKPPPLPEKKNがつけ加えられたことになるが,これだけの情報ではこれらの分子間相互作用を実現しているペプチドモチーフについてはっきりした結論を得るのは相当困難なように思われる.そこでわれわれはさらに進めて,2分子間の相互作用を検出するというシステムを活用することによってcDNA発現ライブラリをスクリーニングし,Ash,NckのSH3に結合する蛋白質を包括的に検索することにした.すると,これまで知られていなかったSH3に結合する思われる分子がかなり多数発見された.現在それらのcDNAクローンの配列を調べているが,それによって,Ash,NckのSH3ドメインの認識するモチーフがより明確にされるものと期待される.

The link molecules are called Ash,Nck,Crk, and the link molecules are called Ash,Nck,Crk. The link molecules are called Ash, Nck, Crk. The link molecules are called Ash, Nck, Crk. GST-fusion protein and immunosedimentation are used to modulate the interaction of other proteins. As a result, the new molecule C3G was found in the Ras protein domain, and the new molecule C3G was found in the Ash domain. As a result,Ash and SH3 have been combined to form a network, and the network is known as mSos EVPPPPPR, PPESPLLPPPR, HSIAGPPPPPR,3BP1 RAPTMPPLPPPPQPAR,3BP2 PPPPRP,3BP2 GPPQVPSRPNRC,C3G DPEKPPPEKN. This information is very difficult to understand and to draw conclusions about the molecular interactions between molecules. The interaction between the two molecules was detected, and the expression of protein was detected. For example, if you want to know more about the molecular structure, you can find out more about the molecular structure. Now, the sequence of the cDNA library is regulated, and the sequence of the cDNA library is clearly identified.