胚性核内レセプターによる制御遺伝子ネットワークの解析

胚胎核受体调控的基因网络分析

• 批准号: 07258216
• 负责人: 梅園 和彦
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Nara Institute of Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07258216/
• 关键词: 核内レセプター; 転写因子; 遺伝子発現制御; ビタミンA

胚発生の過程で、個々の細胞における遺伝子発現制御を液性因子によって仲介するシステムのひとつとして核内レセプターファミリーに注目し、機能構造の詳細な解析、新たなメンバーの同定、レセプター遺伝子の発現制御機構の理解から、制御遺伝子ネットワークの動態について知見を深めることを目的とした。two hybrid systemを哺乳類培養細胞系に応用することにより、核内レセプター間にみられる特異的な蛋白質相互作用とリガンド結合の効果を解析する実験系を確立した。任意の核内レセプターをGAL4のDNA結合ドメイン、VP16の転写活性化ドメインに融合させ、これらを同時に細胞内で発現させてGAL4レポーターの転写活性化を検討することによって、核内でRXRがRXR,TR,VDR,PPARとそれぞれリガンドの非存在時にも安定なヘテロ2量体を形成していること、新たにNGFI-B、LXRと呼ばれる核内レセプターがRXRのパートナーとなりうることを示した。また、RXRがレチノイン酸レセプターとしても機能することから、リガンド添加によるレセプター各サブユニットの転写抑制・誘導能獲得の機構、および新たに見いだされたコリプレッサーSMRTとの相互作用機序についても検討した。初期胚における核内レセプター群の発現や転写制御能を修飾するシグナル因子を検討する目的で、中胚葉・神経誘導におけるアクチビンのシグナル伝達経路を受容体遺伝子の発現パターンから解析した。また、蛍光蛋白質GFPを用いた核内レセプターのin vivoラベル法を新たに開発した。前脳に特異的に発現する新たな核内レセプターTlx遺伝子座をマウスから単離し、構造解析を進めた。この遺伝子は染色体6(ヒトでは10)に存在し、少なくとも20kbの範囲に及び、コーディング領域は9つのエクソンに分断されている。プロモーターと予想される領域の塩基配列決定、およびこれに基づく転写開始点の決定が進行中である。また酵母two hybrid systemにより、Tlxに結合する胚性因子の探索を継続中である。

The process of embryo development, the regulation of gene expression, the regulation of fluid factors, the analysis of functional structure, the identification of new genes, the understanding of gene expression regulation mechanism, the regulation of gene expression, the dynamic regulation of gene expression, and the analysis of functional structure. Two hybrid systems are established for the analysis of specific protein interactions and binding effects in mammalian cell cultures. DNA binding to GAL4, VP16, and VP16 in arbitrary nuclear sites, fusion, and simultaneous development of GAL4, RXR, TR,VDR,PPAR, and in the absence of GAL4, fusion, and simultaneous development of GAL4 and VP16 in arbitrary nuclear sites, and formation of stable GAL4, VP16, and VP16 DNA binding to GAL4, fusion, and VP16 DNA binding to GAL4, fusion, and VP16 DNA. LXR calls for nuclear disarmament. RXR can be used to detect and detect the interaction mechanism of SMRT. The mechanism of SMRT can be used to detect and detect the interaction mechanism of SMRT. The purpose of this study is to analyze the expression of receptor genes in the early embryo, mesoderm and neuroinduction. A new method for detecting GFP in vivo was developed. A new type of nuclear DNA has been discovered in the past. This gene is located on chromosome 6(chromosome 10) and has a 20-kb range and a 9-kb range. The determination of the base arrangement of the field is in progress, and the determination of the base start point is in progress. Yeast two hybrid system, Tlx combination of embryonic factors in the study

项目成果

Chen J.D.,et al.: "Mediation of hormone signaling by the tc domain of nuclear receptors and co-repressor SMRT." Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.,. (印刷中).

Chen J.D. 等人：“核受体 tc 结构域和辅助阻遏物 SMRT 的介导”，《美国国家科学院院刊》。

Forman,B.M.,et al.: "Unique response pathways are established by allosteric interactions among nuclear hormone receptors." Cell. 81. 541-550 (1995)

Forman,B.M.等人：“独特的反应途径是通过核激素受体之间的变构相互作用建立的。”

Willy,P.J,et al.: "LXR, a nuclear receptor that defines a distinct retinoid response pathway." Genes and Development. 9. 1033-1045 (1995)

Willy,P.J,et al.：“LXR，一种核受体，定义了独特的类维生素A反应途径。”

Mangelsdorf, D. J., et al.: "The nuclear receptor superfamily: The second decade." Cell. 83. 835-839 (1995)

Mangelsdorf, D. J. 等人：“核受体超家族：第二个十年。”