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クライオストップトフローX線散乱法による蛋白質フォールディング初期中間体の解析

使用冷冻流动 X 射线散射分析早期蛋白质折叠中间体

基本信息

批准号：
07280226
负责人：
木原裕
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Kansai Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

今回の重点研究の私の研究課題はフォールディング初期中間体として表出すると思われる2次構造形成過程と球状化過程を-50℃近くの温度環境下で直接検出しようとする試みである。2次構造形成は,もしそれがヘリックス・コイル転移速度と同じとすれば,常温でμsのオーダーと思われる。これは温度を下げることにより,遅くすることが可能(?)で、-50℃付近まで下げられれば,ストップフロー法の不感時間(数ms)内で充分観測可能となることが期待される。以上の問題意識に則って,今年は次のような研究を行った。(1)-50℃における蛋白質のフォールディングの研究のために,CDとX線散乱用の装置を組み立てた。ストップトフローCDについては,既に組み立て終えた。一方,ストップトフローX線散乱装置については,1月末に組み立てが終わった。装置の性能テストが当面する課題である。(2)ポリペプチド溶液をモデル物質そひて,コイル→ヘリックス転移をヘリックス安定溶剤を用いて起こさせ,ヘリックス・コイル転移をストップトフローCD法で検出すること,ミオグロビンを対象に,低温においてフォールディング,アンフォールディングをおこさせるよい条件を探すこを試み始めている。まだやっと手がけ始めたところで,現在の所,報告できる成果はまだない。場合によっては,ヘリックス安定剤(例えば,トリフルオロエタノール)を加えることにより,フォールディングをさせる必要があると思われる。

This time, we will focus on the private research project. In the early days of the study, we have been thinking twice about the formation of a spheroidization process in a temperature environment of-50 ℃. The temperature is very high. The speed of movement is the same as that of the normal temperature, and the speed is the same as that of the normal temperature. Under the temperature, the temperature may be (?) If the temperature is-50 ℃ and the temperature is below 50 ℃, the temperature will not change within the time (several ms). It is possible to do so. The above questions are difficult to understand, and this year we will conduct a thorough study. The main results are as follows: (1) in the temperature of-50 ℃, protein and protein were used in the study, and the CD