修飾ヌクレオチドによる生体環境場における情報伝達系の光制御

使用修饰核苷酸对生物环境中的信息转导系统进行光学控制

• 批准号: 08218104
• 负责人: 佐々木 政子
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Tokai University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08218104/
• 关键词: 光応答型オリゴヌクレオチド; 蛍光色素修飾; フルオレセイン; リポソーム; ホスホロチオエ-ト型DNA; エンドサイトーシス; DNAオリゴマー; 細胞内親和部位

本研究は細胞という生体環境場で、変異遺伝子あるいは外来遺伝子の発現による病気の発症を、光化学反応によって阻止する手法の開発を目指している。光応答型オリゴヌクレオチドとして、核酸への結合機能を有する蛍光色素フルオレセインを5'末端に修飾した11merオリゴヌクレオチド(5'-TTTCCTCCTCT-3'、以下F-DNA)を合成し、リポソームに内包させて細胞に取り込ませ、細胞内親和部位およびその動態を蛍光の検出によって調べた。このF′-DNAをさらにDNA分解酵素(DNase)が、F-DNAの核への到達を妨害しないことを明らかにするため、DNA分解酵素に耐性を持つホスホロチオエ-ト型F-DNA(F-S-DNA)を用いてF-DNAの挙動と比較検討した。F-S-DNAリポソームは、細胞内取り込み後F-DNAリポソームと同様にリソソームを経由して細胞核に集積すると考察された。DNaseに耐性を持つF-S-DNAリポソームでも同様の細胞核への集積がみられたことから、F-DNAがDNaseに分解されずに細胞核に到達できる経路の存在が確認できた。細胞核内のF-DNA(またはF-S-DNA)の蛍光は、励起光照射により減衰したが、生理食塩水中で光照射してもほとんど減衰しなかった。この結果はF-DNA(またはF-S-DNA)が細胞核内の物質と何らかの光化学反応を起こしていることを示している。F-DNA(またはF-S-DNA)がインキュベート中に細胞核内DNAあるいはrRNAと二重らせんを形成し、光照射によってF-DNA(またはF-S-DNA)とその相補鎖が共有結合を起こした結果と考察した。以上より、F-DNAおよびF-S-DNAは多層膜の中性リポソームとして細胞核内に到達できること、これらDNAオリゴマーの細胞内移行過程にリソソームを経由するエンドサイトーシス過程が存在することが明らかとなった。

This study aims at the development of methods for the detection of exogenous genes, the development of disease and photochemical reactions, and the development of biological environmental fields, exogenous genes, and exogenous genes. The binding function of nucleic acid binding protein is regulated by the 5'terminal modification of the 5' terminal of the fluorescent pigment (5'-TTTCCTCT-3', F-DNA). The synthesis of fluorescent protein is regulated by the 5 'terminal modification of the 5' terminal of the fluorescent pigment (5'-TTTCCTCT-3', F-DNA). The F-DNA enzyme (DNase) and the F-DNA nuclear enzyme (DNase) were used to investigate the resistance of F-DNA to DNase. F-S-DNA fusion and fusion in cell nucleus were investigated. DNase tolerance, F-S-DNA fragmentation, DNA fragmentation, DNA accumulation, DNA fragmentation, DNA sequencing, DNA sequencing, DNA sequencing. F-DNA(F-S-DNA) in the nucleus is attenuated by light irradiation and physiological water irradiation. As a result, F-DNA(F-S-DNA) and photochemical reactions in the nucleus of cells are initiated. F-DNA (F-S-DNA) is the most common type of DNA in the nucleus. The above F-DNA and F-S-DNA multilayers are neutral in the process of nuclear migration, and the DNA multilayers are neutral in the process of intracellular migration.

项目成果

K.Kohmoto,M.Sasaki and T.Kawaguchi: "Wavelength range of W-A,B,C andradation characteresties of W fluolescent lamps for medical use." Photomedicine and Photobiology. 18. 33-37 (1996)

K.Kohmoto、M.Sasaki 和 T.Kawaguchi：“医用 W 荧光灯的 W-A、B、C 波长范围和辐射特性”。

S.Takeshita,T.Sakata and M.SAsaki: "Diurnal seasonal variation of solar W-B irradiance" Photomedicine and Photobiology. 18. 31-32 (1996)

S.Takeshita、T.Sakata 和 M.SAsaki：“太阳 W-B 辐照度的昼夜季节性变化”光医学和光生物学。

J.Hayashi and M.Sasaki et.al.: "Intracellular photochemical reaction of a fluoreseein-labeled s-oligodeonyribonucleotide" Photomedicine and Photobiology. 18. 109-110 (1996)

J.Hayashi 和 M.Sasaki 等人：“荧光素标记的 s-寡聚核糖核苷酸的细胞内光化学反应”光医学和光生物学。

M.KobayAshi and M.Sasaki et.al.: "Photocleavoge of DNA by xanthene dyes in the singlet excited states." Photomedicine and Photobiology. 18. 121-126 (1996)

M.KobayAshi 和 M.Sasaki 等人：“在单重激发态下通过呫吨染料对 DNA 进行光裂解。”

S.Takeshita,T.Sakata and M.SAsaki: "Development and Evaluation of a solar ulthraviolet-B radiometer" J.Light & Vis.Env.20・1. 51-59 (1996)

S.Takeshita、T.Sakata 和 M.SAsaki：“太阳紫外线 B 辐射计的开发和评估”J.Light & Vis.Env.20・1 (1996)。