权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

修飾ヌクレオチドによる生体環境場における情報伝達系の光制御

使用修饰核苷酸对生物环境中的信息转导系统进行光学控制

基本信息

批准号：
07228106
负责人：
佐々木政子
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Tokai University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では,細胞という生体環境場で,遺伝子DNAの変異あるいは外来遺伝子の情報伝達によって発現される病気を,光化学反応によって阻止し,病気を起こさせなくする手法の開発を目指している.光応答型オリゴヌクレオチドとして,核酸への結合あるいは切断機能を有する蛍光色素フルオレセインで修飾した11merオリゴヌクレオチド(以下 F-DNA 図1)を合成し,試験細胞にヒト培養ケラチノサイトを用いて,F-DNAの 1)光照射による塩基配列相補的なDNAへの光結合あるいは光切断反応 2)細胞内導入法 3)細胞内親和部位の検出と細胞内取り込みプロセスを検討した.はじめに,細胞質内の親和小器官について検討した.アンチセンス療法やアンチジーン法の研究者等は様々な手法で,薬剤の細胞内取り込みを検討している.しかし,取り込みプロセスを明確にしているものは殆どない.本研究では,F-DNAの細胞内への導入プロセスはエンドサイトーシスの可能性が強いと考察し検討した.F-DNA包埋リポソームがエンドサイトーシスで細胞内に導入される場合,F-DNAの細胞質内の親和小器官はリソソームであるとの仮定が成立する.リソソーム内には種々の加水分解酵素が存在しており,その一つにβ-ガラクトシダーゼリソソームマーカー酵素がある.この酵素は,フロロジェニックな基質フルオレセインジ-(β-D-ガラクトピラノシド) (FDG)に出会うとFDGを分解させ蛍光フルオレセインを放出させる.このFDGの発蛍光性をマーカーとして,FDG包埋リポソームの細胞質内の親和小器官を検討した.リポソームの細胞質内の親和部位はリソソームと判明した.次に,核部のF-DNA親和部位について検討した.核小体内の蛍光強度は,細胞質内小器官の蛍光強度より高く検出され,この蛍光は励起後約30秒で褪色した.結果1)を考慮すると、核近傍でF-DNAの光結合の可能性が示唆された.以上まとめると,F-DNA包埋リポソームはエンドサイトーシスによって細胞内へ導入され,さらに核部の核小体に親和する.F-DNAがシソソームから核へ移行する過程については現在なお検討中である.

This study aims to explore the development of methods for the detection and prevention of disease by photochemical reaction in response to changes in gene DNA and information transmission from foreign genes in cells and organisms. The light response type has the function of combining nucleic acids and cutting off nucleic acids. The light response type has the function of modifying nucleic acids and modifying nucleic acids.(1) F-DNA synthesis, cell culture,F-DNA synthesis,F-DNA synthesis, F-DNA synthesis In the cytoplasm, the affinity small organs are examined. The researchers of the drug therapy and the drug therapy have been working on a new approach to drug intracellular extraction. The answer to this question is clear. In this study, we investigated the possibility of F-DNA intracellular transformation into F-DNA. In the case of F-DNA encapsulation into F-DNA intracellular transformation, we found that F-DNA cytoplasmic transformation into F-DNA cytoplasmic affinity organelle was possible. In the solution group, the hydrolysis enzyme is present, and the β-glucuronidase is present. The enzyme is released from the protein matrix-(β-D-) (FDG) in the presence of FDG. This FDG is a light emitting substance, and FDG is embedded in the cytoplasm of small organs. The affinity sites in the cytoplasm of the complex were identified. Secondly, the F-DNA affinity site in the nucleus is carefully examined. The intensity of light in nucleosomes was higher than that in small cytoplasmic organs, and the light faded about 30 seconds after excitation. Results 1) The possibility of F-DNA photobinding in the nuclear vicinity was considered. F-DNA embedding systems are involved in the process of nuclear translocation, and F-DNA embedding systems are involved in the process of nuclear translocation.