細胞外マトリックス各成分から再構成した超分子構造体

由细胞外基质各成分重构的超分子结构

• 批准号: 08231213
• 负责人: 林 利彦
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08231213/
• 关键词: V型コラーゲン; IV型コラーゲン; コラーゲン会合体超構造; コラーゲンゲル; 水和; コラーゲン細線維; 網目構造; 基底膜

コラーゲンタンパク質ファミリーに共通するコラーゲンらせん構造がコラーゲンに共通する性質・機能にどのように関係するか。多様なコラーゲンタンパク質分子の違いはこれまで非コラーゲンらせんドメインに焦点があてられてきたが、コラーゲンらせん構造そのものに分子種による特異性があるのか、あるとしたら、どのような構造に由来するのか。これらの問題の解明に生体組織(ウシレンズカプセル、ヒト胎盤、ウシ角膜など)からIV型コラーゲンおよびV型コラーゲンの単離し、単離したコラーゲンを種々の温度、pH、イオン濃度などの下に置き、超構造の再生に必要な条件を検討した。さらに再構成された超構造の特徴を解明した。ウシレンズカプセルから抽出したIV型コラーゲンを2Mグアニジン塩酸プラス10mMジチオスレイトール(DTT)中、4℃、あるいは、リン酸緩衝液,pH7.3,に0.15M NaClを加え、4℃あるいは28℃にてゲルが形成された。ゲルは網目状構造を示し、分岐間の平均距離は15nmで、マウス膵臓の基底膜構造の網目構造と類似していた。V型コラーゲンをリン酸緩衝液、pH7.4,中で形成された会合体を電顕にて観察し、α3(V)を含むV型コラーゲン亜型も67nmの横紋構造を有し、横紋周期より細い線維を形成しうることが判明した。これらの結果を以下の仮説にまとめた。I型コラーゲン、IV型コラーゲン、V型コラーゲン中のコラーゲンらせんドメインが有する構造的・機能的特徴で共通性なことはコラーゲンらせんは低温で水和が大で、37℃など温度をあげるとサイドバイサイドに並んで会合する。IV型コラーゲンらせんにはらせんの乱れがあるため、らせんに折れ曲がりがあるため、会合体構造は網目構造になり、I型コラーゲン、V型コラーゲンの会合体は線維状になる。

コ ラ ー ゲ ン タ ン パ ク qualitative フ ァ ミ リ ー に common す る コ ラ ー ゲ ン ら せ ん tectonic が コ ラ ー ゲ ン に common す る properties, function に ど の よ う に masato is す る か. Many others な コ ラ ー ゲ ン タ ン パ ク qualitative molecular の violations い は こ れ ま で non コ ラ ー ゲ ン ら せ ん ド メ イ ン に focus が あ て ら れ て き た が, コ ラ ー ゲ ン ら せ ん tectonic そ の も の に molecules of に よ る specificity が あ る の か, あ る と し た ら, ど の よ う な tectonic に origin す る の か. こ れ ら の problem の interpret に living tissues (ウ シ レ ン ズ カ プ セ ル, ヒ ト placenta, ウ シ corneal な ど) か ら IV コ ラ ー ゲ ン お よ び v-shaped コ ラ ー ゲ ン の 単 from し, 単 し た コ ラ ー ゲ ン を kind 々 の temperature, pH, イ オ ン concentration な ど に buy き, ultra structure under の の regeneration に な necessary conditions を beg し 検 た. Youdaoplaceholder0 then reconstitute された superstructure <s:1> characteristics を explain た. ウ シ レ ン ズ カ プ セ ル か ら spare し た IV コ ラ ー ゲ ン を 2 M グ ア ニ ジ ン acid salt プ ラ ス 10 mm ジ チ オ ス レ イ ト ー ル (DTT), 4 ℃, あ る い は, リ ン acid buffer, pH7.3, 0.15 M NaCl に を え, 4 ℃ あ る い は 28 ℃ に て ゲ ル が form さ れ た. ゲ ル は mesh structure を し, gaps between の average distance は 15 nm で, マ ウ ス Cui viscera の basement membrane structure の mesh と similar し て い た. V コ ラ ー ゲ ン を リ ン acid buffer, pH7.4 slightly, で forming さ れ た will fit を electric 顕 に て 観 し, alpha 3 (V) contains を む v-shaped コ ラ ー ゲ ン 亜 も 67 nm の を し, horizontal grain structure horizontal stripes cycle よ り fine い line d を form し う る こ と が.at し た. Youdaoplaceholder2 れら れら result を the following 仮 仮 says にまとめた. Type I コ ラ ー ゲ ン, type IV コ ラ ー ゲ ン, v-shaped コ ラ ー ゲ ン in の コ ラ ー ゲ ン ら せ ん ド メ イ ン が have す る structure, function of 徴 で convergence な こ と は コ ラ ー ゲ ン ら せ ん は で が で, and water at low temperature of 37 ℃ な ど temperature を あ げ る と サ イ ド バ イ サ イ ド に and ん meet で す る. Type IV コ ラ ー ゲ ン ら せ ん に は ら せ ん の disorderly れ が あ る た め, ら せ ん に fold れ qu が り が あ る た め, will fit structure は mesh structure に な り, type I コ ラ ー ゲ ン, v-shaped コ ラ ー ゲ ン の will fit は line d shape に な る.

项目成果

Tasuku Sasaki: "Evidence for Extracellular Processing of Type IV Collagen alpha Chains in Human Fibroblast Culture" Matrix Biology. 15. 158 (1996)

Tasuku Sasaki：“人类成纤维细胞培养物中 IV 型胶原 α 链细胞外加工的证据”基质生物学。

Keiko Sakai: "Specific Function of the Multimeric Fibronectin Formed in viro as Revealed by the Interaction with HT1080 Cells" Matrix Biology. 15. 157 (1996)

Keiko Sakai：“通过与 HT1080 细胞相互作用揭示的体外形成的多聚纤连蛋白的特殊功能”基质生物学。

今村保忠: "コラーゲンファミリー細胞接着 BioScience用語ライブラリー" 宮坂昌之、矢原一郎編、羊土社,東京, 8 (1996)

Yasutada Imamura：“胶原家族细胞粘附生物科学术语库”，由 Masayuki Miyasaka 和 Ichiro Yahara 编辑，Yodosha，东京，8 (1996)

Masao Iwata: "The 160k α1(IV)chain,a short form of type IV collagen polypeptide,of bovine lens capsule retains the NCl domain" J.Biochem.120. 133-137 (1996)

Masao Iwata：“牛晶状体囊的 160k α1(IV) 链，一种 IV 型胶原蛋白多肽的短形式，保留了 NCl 结构域”J.Biochem.120 (1996)。

Masatoshi Muraoka: "Gel Formation from the Type IV Collagen from Bovine Lens Capsule in Guanidine-HCl and Dithothreitol" J.Biochem.,. 119. 167-172 (1996)

Masatoshi Muraoka：“来自牛晶状体胶囊的 IV 型胶原蛋白在盐酸胍和二硫苏糖醇中的凝胶形成”J.Biochem.,。