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フェニールプロパノイド合成系鍵酵素遺伝子の器官特異的発現と環境シグナル応答

苯丙素合成系统关键酶基因的器官特异性表达及环境信号反应

基本信息

批准号：
08262215
负责人：
山田哲治
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.遺伝子改変プロモータを用いたLoss of functionの実験結果から、PSPAL1遺伝子5′-プロモータ領域に含まれるエリシターよる発現誘導応答に必要なシス因子として、box 1(L-box)およびbox 2(P-box)があげられる.このことはbox 2とbox4を4-8ユニット繰り返し配列で繋いだキメラ・プロモータを用いたGain function実験からも更に裏付けられた.トランジェントアッセイの解析に加え、box 1(L-box),box 2(P-box),box 4(AT-box)各ボックスシークエンスを除去した遺伝子改変プロモータをGUSレポーター遺伝子に連結したpBI系遺伝子組換えプラスミドをタバコに導入し、トランスジェニックタバコにおけるin planta loss of function実験を行った.その結果、これらのボックスシークエンスは、エリシターやUV照射による発現誘導応答に必要であるばかりでなく、basalなPSPAL1のプロモータの発現にも影響を及ぼすことが明らかとなった.これらのシス因子は単独ではプロモータの活性化に及ぼす効果が少なく、これらのボックスに結合する調節タンパク質が協調的に働いていると考えられる.2.エンドウカルコン合成酵素(CHS)遺伝子は少なくとも8つのメンバーからなる遺伝子ファミリーを形成していることが明らかとなり、各々のメンバーの組織特異的・環境刺激特異的発現パターンを調べたところ、CHS遺伝子ファミリーの8つのメンバーは少なくとも3つのサブファミリーにグループ分けすることができることが明らかとなった。これらのうち2つのエリシター応答性グループのプロモータにはBox-1,G-Box,Box-2配列が保存されており、これらの配列がエリシター応答に重要であることが、塩基置換を導入したプロモータのトランジェント・トランスフェクション・アッセイによっても確認された。また、エリシター等のシグナルによる急激なCHS活性の増加は転写の活性化のみならず、遺伝子ファミリーの各メンバーの協調的な活性化、並びに転写後の調節機構にも基因することが推察された。

1. The Loss of function in the implementation of the function is the result of PSPAL1. The necessary factors for the occurrence of the function are box 1(L-box) and box 2(P-box). This is the case with box 2 and box4, and the case with box 4 and box 4. box 1 (L-box),box 2 (P-box),box 4 (AT-box), box 1(L-box),box 2(P-box),box 4(AT-box), box 1 (L-box), box 2(P-box), box 3 (AT-box),box 4(AT-box), box 5 (AT-box), box 6 (AT-box), box 7 (AT-box), box 8 (AT-box), box 9 (AT-box), box 1 (AT-box), box 9 (AT-box), box 9 As a result, the occurrence of UV irradiation is necessary for the occurrence of UV irradiation. The occurrence of UV irradiation is necessary for the occurrence of UV irradiation. The factors that affect the activity and efficiency of the enzyme are: 1. the activity and efficiency of the enzyme are reduced; 2. the activity and efficiency of the enzyme are reduced; 3. the activity and efficiency of the enzyme are reduced; 4. the activity and efficiency of the enzyme are reduced; 5. the activity and efficiency of the enzyme are reduced; 6. the activity and efficiency of the enzyme are reduced; and 7. the activity and efficiency of the enzyme are reduced. The tissue specific and environmental stimulus-specific occurrence of each disease is regulated by the CHS gene. The Box-1,G-Box,Box-2 configuration is maintained, and the configuration is maintained. It is important that the base switch is introduced into the box-1,G-Box,Box-2 configuration. The increase of CHS activity due to the rapid development of the gene chain and the coordination of the gene chain and the regulatory mechanism after the gene chain was developed.