血管内皮細胞のタイト結合蛋白7H6とがん細胞の血管外脱出の抑制

血管内皮细胞紧密连接蛋白7H6及其抑制癌细胞外渗

• 批准号: 08265253
• 负责人: 澤田 典均
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08265253/
• 关键词: タイト結合; ZO-1; 7H6(barmotin); 細胞電気抵抗; SMC蛋白

1.目的血管内皮細胞間にはタイト結合が存在し、イオンや蛋白のみならず炎症細胞や癌細胞のintra-およびextra-vasationに関与していると考えられている。したがって、タイト結合の機能(バリア機能)を調節することにより癌細胞の血管への出入りを制御できる可能性がある。我々が発見したタイト結合蛋白のひとつ、7H6蛋白(barmotin)の発現はバリア機能と相関するため、barmotinのcDNA発現クローニング、シークエンスを行い、barmotinの機能を明らかにすると共に、タイト結合の機能調節機構を明かにする。2.方法と結果1)株化した肺毛細血管内皮細胞(RLE)をtranswellに単層培養し、その電気抵抗(transendothelial electrical resistance:TER)を測定することにより、タイト結合のバリア機能を評価したところ、db-cAMPとretinoic acidは有意にTERを上昇させるとともに7H6の細胞辺縁への発現を誘導した。この時RLEへの癌細胞のもぐりこみは、対照に比べ約60%抑制された。同様の結果は、腹腔中皮細胞を用いた研究でも得られた。2)Barmotinは、1184aaからなる蛋白で、既知の蛋白には高いホモロジーを示すものはなかった。構造を調べると、N末とC末にそれぞれWalker's A siteとWalker's B siteと呼ばれるATPaseに特徴的なドメイン構造が離れて存在し、両ドメインの間にはふたつのcoiled coilドメインを有していた。このような構造は最近発見された分子モーターSMC familyに特徴的で、barmotinはSMC1 subfamilyに属することが明らかとなった。

1. Purpose between endothelial cells に は タ イ ト combining が し, イ オ ン や protein の み な ら ず inflammatory cells や cancer の intra - お よ び extra - vasation に masato and し て い る と exam え ら れ て い る. し た が っ て, タ イ ト combining の function (バ リ ア function) を adjust す る こ と に よ り cancer の vascular へ の discrepancy り を suppression で き る possibility が あ る. See my 々 が 発 し た タ イ ト binding protein の ひ と つ, 7 h6 protein (barmotin) の 発 now は バ リ ア function と phase masato す る た め, barmotin の cDNA 発 now ク ロ ー ニ ン グ, シ ー ク エ ン ス を い, barmotin の function を Ming ら か に す る と に, タ イ ト combining の を Ming か functional regulation institutions Youdaoplaceholder0. 2. Methods と results 1) Strain of <s:1> pulmonary capillary endothelial cells (RLE)をtranswellに単 layer culture of <s:1> and そ radioactive electrical resistance (transendothelial electrical Hold: TER) determination of を す る こ と に よ り, タ イ ト combining の バ リ ア function を review 価 し た と こ ろ, db - cAMP と retinoic acid は intentionally に TER を rise さ せ る と と も に 7 h6 の cells 辺 try へ の 発 now を induced し た. When <s:1> <s:1>, RLEへ, cancer cells <e:1> ぐ, ぐ, <s:1>, み, された, and compared with に, it inhibits された by approximately 60%. Similarly, the results of を and the peritoneal cutaneous cells を were studied by the を た and で obtained られた. 2) Barmotin は, 1184 aa か ら な る protein で, both know の protein に は high い ホ モ ロ ジ ー を shown す も の は な か っ た. Tectonic を adjustable べ る と, at the end of the N と C at the end of the に そ れ ぞ れ Walker 's A site と Walker' s B site と shout ば れ る ATPase に of 徴 な ド メ イ が ン structure from れ て し, struck ド メ イ ン の between に は ふ た つ の coiled coil ド メ イ ン を have し て い た. こ の よ う な tectonic 発 は last see さ れ た molecular モ ー タ ー SMC family に 徴 で, especially barmotin は SMC1 subfamily に genus す る こ と が Ming ら か と な っ た.

项目成果

Sawada,N.et al.: "p21^<waf-1/cip-1/sdi-1> is expressed at G1 phase in primary culture of hepatocytes from old rats,presumably prebenting the cells from entering the S phase of the cell cycle." Biochem.Biophys.Res.Commun.228. 819-824 (1996)

Sawada,N.et al.：“p21^<waf-1/cip-1/sdi-1> 在老年大鼠肝细胞原代培养物的 G1 期表达，可能使细胞提前进入 S 期

Satoh,H.et al: "Localization of 7H6 tight junction-associated antigen along the cell border of vascular endothelial cells correlates with paracellular barrier function against ions,large molecules and cancer cells." Exp.Cell.Res.222. 269-274 (1996)

Satoh, H.等人：“7H6 紧密连接相关抗原沿血管内皮细胞细胞边界的定位与针对离子、大分子和癌细胞的细胞旁屏障功能相关。”

Kato,J.et al: "Hepatic iron deprivation prevents spontaneous development of fulminant hepatitis and liver cancer in LEC rats." J.Clin.Invest.98. 923-929 (1996)

Kato, J. 等人：“肝铁缺乏可防止 LEC 大鼠自发发生暴发性肝炎和肝癌。”

Sawada,N.et al: "Expression of p21^<waf-1/cip-1> is significantly induced in the livers of LEC rats with chronic liver injury." Jpn.J.Cancer Res.87. 1102-1105 (1996)

Sawada,N.et al：“在患有慢性肝损伤的 LEC 大鼠的肝脏中显着诱导 p21^<waf-1/cip-1> 的表达。”

Yamada-Sasamori,Y.et al.: "Rapid induction of 7H6 ti8ght junction-associated protein and paracellular barrier function in capillary endothelial cells of porcine brain in vitro by treatment with astrocyte conditioned medium and cAMP." Med.Electr.Microsc.,.

Yamada-Sasamori,Y.et al.：“通过星形胶质细胞条件培养基和 cAMP 处理，在体外猪脑毛细血管内皮细胞中快速诱导 7H6 ti8ght 连接相关蛋白和细胞旁屏障功能。”