腎尿細管ATP感受性K^+チャネルのホンプ,輸送体との機能的連関

肾小管ATP敏感K^+通道与转运蛋白的功能关系

• 批准号: 08268244
• 负责人: 河原 克雅
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08268244/
• 关键词: ATP感受性Kチャネル; 免疫組織法; ウエスタンブロット法; イオン輸送機能; Na^+; K^+ ATPase; 共役蛋白

ラット膵β細胞からクローニングされたATP感受性KチャネルuK_<ATP>-1(Kir6.1)の腎臓における発現を、免疫組織法とウエスタンブロット法により調べた。腎糸球体と細いヘンレループにはuK_<ATP>-1の発現が見られず、近位尿細管、太いヘンレの上行脚、集合管(皮質>髄質外層>髄質内層)において強く発現していた。発現量の順位は、従来知られている腎尿細管各セグメントのNa輸送能の順位とほぼ一致した。尿細管細胞内の局在性について、共焦点レーザー顕微鏡を使い調べた。細胞全体に不規則に発現している蛍光像が観察された。同様の方法を使って、新生児期ラットの腎尿細管の形態学的発達(イオン輸送機能の発達)とuK_<ATP>-1の発現量を、各日齢(5、10、15日)で比較した。uK_<ATP>-1は近位尿細管の形態学的成熟に従って発現が増加した。これらの結果は、uK_<ATP>-1が尿細管におけるイオン輸送機能に重要な役割を果たす事を示唆した。本実験の経過中に、uK_<ATP>-1単独ではNa^+/K^+ ATPaseとの共役Kチャネルとして機能しない可能性が生じたので、uK_<ATP>-1の機能発現を修飾する共役蛋白(or subunits)の探索を試みた。CHIF(channel-inducing factor)(Attali et al.,1995)の塩基配列を元にして調製したオリゴヌクレオチドを使って、ラット腎cDNAライブラリーからCHIFホモログを単離した。現在、COS1細胞に共発現させATP感受性Kチャネルの電気生理学的、薬理学的特性の解析とイオンチャネルの活性化を調節する分子機構について実験を進めている。

ラット膵β-cell からクローニングされたATP sensitivity KチャネルuK_<ATP>-1( Kir6.1) The kidney function method is the same as the immunohistochemical method. Renal glomerulus, thin urinary duct, Tai いヘンレの ascending foot, collecting duct (cortex > outer layer of the lining > inner layer of the lining) is strong and strong. The order of the amount of the current amount is the same as that of the renal and urinary tubes. The localization of the urine tubule cells and the confocal microscopy are used to adjust the structure. The overall appearance of the cells is irregular and irregular. The same method is used to determine the morphology of the renal and urinary tubules in the neonatal stage (the transport function of the kidney).発达)とuK_<ATP>-1 is the current amount, each day (5th, 10th, 15th) is compared. uK_<ATP>-1 has a mature morphology of proximal urinary capillaries and has become more mature. The result of これらの, uK_<ATP>-1がUrine straw におけるイオン conveyor function is important なservice cut をfruit たす事をshows instigation した.本実験の経中に、uK_<ATP>-1単多ではNa^+/K^+ ATPase と の co-service K チ ャ ネ ル と し て function し な い possibility が生 じ た の で, uK_<ATP>-1 の function 発 Show を modification す る compatibility protein (or subunits) の exploration を trial み た. CHIF (channel-inducing factor) (Attali et al. al., 1995) No. Make って, ラットKidney cDNA ライブラリーからCHIF ホモログを単leave した. Now, COS1 cells have been shown to be ATP sensitive and electrochemical, physiological and theoretical. Characteristics Analysis: Activation and Regulation of Characteristics: Molecular Structure: Activation and Regulation.

项目成果

河原克雅: "非選択性陽イオンチャネル" 日本臨床. 54(3). 679-684 (1996)

Katsumasa Kawahara：“非选择性阳离子通道”日本临床杂志 54(3) (1996)。

Kawahara,K.: "Potassium Transport and potasslum channels in the kidney Tubules." Jpn.J.Physiol.47(未定). (1997)

Kawahara, K.：“肾小管中的钾转运和钾通道。”Jpn.J.Physiol.47（待定）。

河原克雅: "腎集合管のK輸送とKチャネル" 自律神経. 33(3). 213-215 (1996)

Katsumasa Kawahara：“肾集合管中的 K 转运和 K 通道”自主神经学 33（3）。

Mori.M.: "ATP-activated cation conductance in a Xenopus renal epithelial cell line." J.Physiol. (Land). 491(2). 281-290 (1996)

Mori.M.：“非洲爪蟾肾上皮细胞系中 ATP 激活的阳离子电导。”

河原克雅: "体液のK^+調節と腎尿細管のK^+チャネル21GC05:北里医学" 27(1). 1-8 (1997)

Katsumasa Kawahara：“体液的 K^+ 调节和肾小管 K^+ 通道 21GC05：北里医学”27(1) (1997)。