腎尿細管ATP感受性K^+チャネルのホンプ,輸送体との機能的連関

肾小管ATP敏感K^+通道与转运蛋白的功能关系

• 批准号: 08268244
• 负责人: 河原 克雅
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08268244/
• 关键词: ATP感受性Kチャネル; 免疫組織法; ウエスタンブロット法; イオン輸送機能; Na^+; K^+ ATPase; 共役蛋白

ラット膵β細胞からクローニングされたATP感受性KチャネルuK_<ATP>-1(Kir6.1)の腎臓における発現を、免疫組織法とウエスタンブロット法により調べた。腎糸球体と細いヘンレループにはuK_<ATP>-1の発現が見られず、近位尿細管、太いヘンレの上行脚、集合管(皮質>髄質外層>髄質内層)において強く発現していた。発現量の順位は、従来知られている腎尿細管各セグメントのNa輸送能の順位とほぼ一致した。尿細管細胞内の局在性について、共焦点レーザー顕微鏡を使い調べた。細胞全体に不規則に発現している蛍光像が観察された。同様の方法を使って、新生児期ラットの腎尿細管の形態学的発達(イオン輸送機能の発達)とuK_<ATP>-1の発現量を、各日齢(5、10、15日)で比較した。uK_<ATP>-1は近位尿細管の形態学的成熟に従って発現が増加した。これらの結果は、uK_<ATP>-1が尿細管におけるイオン輸送機能に重要な役割を果たす事を示唆した。本実験の経過中に、uK_<ATP>-1単独ではNa^+/K^+ ATPaseとの共役Kチャネルとして機能しない可能性が生じたので、uK_<ATP>-1の機能発現を修飾する共役蛋白(or subunits)の探索を試みた。CHIF(channel-inducing factor)(Attali et al.,1995)の塩基配列を元にして調製したオリゴヌクレオチドを使って、ラット腎cDNAライブラリーからCHIFホモログを単離した。現在、COS1細胞に共発現させATP感受性Kチャネルの電気生理学的、薬理学的特性の解析とイオンチャネルの活性化を調節する分子機構について実験を進めている。

The expression of ATP-sensitive K-<ATP>1 (Kir6.1) in the kidney was detected by immunohistochemical method and the expression of ATP-sensitive K-1 (Kir6.1) was detected by immunohistochemical method. The expression of uK-<ATP>1 in renal glomerulus was stronger than that in proximal urinary tubule, distal urinary tubule and collecting duct (cortex&gt; outer cytoplasm&gt; inner cytoplasm). The order of Na transport energy in renal tubule is consistent with that in urine tubule. In the urine tubule cells, there is a natural, confocal point, and a microscopic point. The whole cell is irregular and the light image is observed. The morphologic development of renal tubule in neonatal period and the quantity of uK<ATP>-1 were compared at 5, 10 and 15 days after birth. uK_<ATP>-1 increased in the morphological maturation of proximal urinary tubules. The result is that the uK-<ATP>1 is an important part of the urine delivery function. In this paper<ATP>, we try to explore the possibility of co-active protein or subunits for Na^+/K^+ ATPase <ATP>and co-active protein or subunits for uK_ -1. CHIF(channel-inducing factor)(Attali et al., 1995), the basic sequence of the gene is modulated, and the gene sequence of the gene is modulated. Now, COS1 cells co-develop ATP-sensitive K cells, analyze the electrophysiological and physiological characteristics of the cells, and regulate the activation of the cells.

项目成果

河原克雅: "非選択性陽イオンチャネル" 日本臨床. 54(3). 679-684 (1996)

Katsumasa Kawahara：“非选择性阳离子通道”日本临床杂志 54(3) (1996)。

Kawahara,K.: "Potassium Transport and potasslum channels in the kidney Tubules." Jpn.J.Physiol.47(未定). (1997)

Kawahara, K.：“肾小管中的钾转运和钾通道。”Jpn.J.Physiol.47（待定）。

河原克雅: "腎集合管のK輸送とKチャネル" 自律神経. 33(3). 213-215 (1996)

Katsumasa Kawahara：“肾集合管中的 K 转运和 K 通道”自主神经学 33（3）。

Mori.M.: "ATP-activated cation conductance in a Xenopus renal epithelial cell line." J.Physiol. (Land). 491(2). 281-290 (1996)

Mori.M.：“非洲爪蟾肾上皮细胞系中 ATP 激活的阳离子电导。”

河原克雅: "体液のK^+調節と腎尿細管のK^+チャネル21GC05:北里医学" 27(1). 1-8 (1997)

Katsumasa Kawahara：“体液的 K^+ 调节和肾小管 K^+ 通道 21GC05：北里医学”27(1) (1997)。