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酵母核機能におけるユビキチン経路の役割り

泛素途径在酵母核功能中的作用

基本信息

批准号：
08274204
负责人：
菊地淑子
金额：
$ 1.22万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08274204/
关键词：
出芽酵母ユビキチンライゲ-ス G2 M停止核輸送復帰変異

项目摘要

出芽酵母温度感受性変異株tom1は高温下におくと細胞周期G2/M期で増殖を停止する。さらに、核が膨潤し核小体がバラバラに断片化するなど核構造の異常が観察される。tom1温度感受性変異株がmRNAのExportに欠損を持つか、オリゴdTをプローブにしたFISH法で調べたところ、mRNAが核膜周辺に蓄積していた。従って、TOM1は核輸送にも関与していることが分かった。TOM1遺伝子は分子量360KdのC末端にhectドメインを持つユビキチンライゲ-スをコードしている。Tomlpのhectドメインを欠失すると細胞は温度感受性増殖となるが、この細胞に核蛋白-hectドメイン融合蛋白を大量生産させると温度感受性が相補された。このことはユビキチンライゲ-スとしてのTom1蛋白が核内でも機能していることを予想させる。さらに、tom1温度感受性の復帰変異(tmr,tom1 revertant)として、cyr1やsch9が単離され、PDE2やBCY1がマルチコピーサプレッサーとなることから、tom1温度感受性はRAS-cAMP経路の活性を下げることによって抑圧されることが分かった。また、フォスファターゼ2AのBサブユニットをコードするCDC55にベノミル感受性変異が入ることによってtom1温度感受性を抑圧した。この変異はCDC55破壊株とは異なり細胞形態に異常を引き起こさない変異で、種を越えてよく保存されたN端近くの領域に存在していた。今後はユビキチン化を受けるターゲット蛋白の検索、直接相互作用する蛋白の検索などにより、蛋白のユビキチン化/分解という局面から核構造と機能、特に核輸送について分子レベルで研究する。

The temperature-sensitive budding yeast strain tom1 is able to stop proliferation in the G2/M phase of the cell cycle at high temperatures.さらに、nuclear swelling しnucleosome がバラバラに fragmentation するなど abnormality of nuclear structure が観看される. tom1 temperature sensitive strain がmRNAのExportに无码をholdつか、オリゴdT The をプローブにしたFISH method is adjusted and the mRNA is accumulated around the nuclear membrane.従って, TOM1 はNUclear transport にも关 and していることが分かった. TOM1's molecular weight is 360Kd, and the C-terminal hect is the same. Tomlpのhectドメインをawn lossするとcellはtemperature-sensitive proliferationとなるが、この fine The nuclear protein-hectin fusion protein is mass-produced and the temperature sensitivity is complementary.このことはユビキチンライゲ-スとしてのTom1 protein がnuclear でもfunction していることをyu want to させる.さらに、tom1 temperature sensitivity difference (tmr, tom1 revertant)として、cyr1やsch9が単利され、PDE2やBCY1がマルチコピーサプレッサーとなることから, tom1 temperature sensitivity はRAS-cAMP経路のActivity を下げることによって suppress pressure されることが分かった.また、フォスファターゼ2AのBサブユニットをコードするCDC55にベノミルsensitivity剉differentが入ることによってtom1Temperature sensitivityを氧した. The abnormal cell morphology of the CDC55 broken strain and the abnormal cell morphology caused the disease.い変different で、kind of をcross えてよく to save されたN end near くの区にexisting していた. From now on, the はユビキチンをReceived けるターゲットprotein の検SO, direct interaction するprotein の検SO などにより, egg Research on the structure and function of the nuclear structure and the special nuclear transport molecules and molecules.