酵母ユビキチンライゲ-スによる細胞増殖制御

酵母泛素连接酶对细胞增殖的控制

• 批准号: 08278204
• 负责人: 菊地 淑子
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08278204/
• 关键词: 出芽酵母; ユビキチン・ライゲ-ス; 2-ハイブリド法

出芽酵母ミニ染色体安定保持に関与するBUL1遺伝子と相互作用する遺伝子を2-ハイブリド法により検索し、RSP5遺伝子を単離した。Rsp5蛋白のC末端側半分はヒトのE6-APと相同性を持つユビキチンライゲ-スである。E6-APはウイルスE6と共に癌抑制遺伝子P53をユビキチン化し癌化へと導く。Bull蛋白はRsp5ユビキチンライゲ-スと大きな複合体を形成しているが、パルスチェイス実験によりBull蛋白はRsp5蛋白のターゲット蛋白ではなく、調節因子と考えている。ユビキチン経路の最終ステップの複雑な基質認識と活性化調節機構の解明をめざし、まず、酵母rsp5温度感受性変異のマルチコピーサプレッサーを2種単離した。G0期に細胞が小さくなり呼吸と関連していると考えられているWHI2については、さらに、2-ハイブリド法によりWhi2と複合体を形成する蛋白の遺伝子を単離した。ゲノムデータベース検索により、相同性のある遺伝子をPCR法により単離した。これらの遺伝子破壊株は単独では表現型が観察できないが、現在、2重破壊株を作成することを試み、遺伝子産物の相互関係を明らかにする予定である。もう1種のマルチコピーサプレッサーAst1はシャペロンの様に働いているのかも知れない。さらに、Rsp5と複合体を形成しているBull蛋白がユビキチンライゲ-スの調節因子であるなら、ユビキチン化への信号伝達経路が存在するはずである。実際、bull変異株は野生株に比してクロロフォルムに耐性であった。

Budding yeast ミ ニ chromosome stability and maintain に masato and す る BUL1 posthumous son 伝 と interaction す る posthumous son 伝 を 2 - ハ イ ブ リ ド method に よ り 検 cable し, RSP5 but 伝 を 単 from し た. The <s:1> C-terminal side half of the Rsp5 protein is <s:1> ヒト <s:1> E6-APと identical and を holds スである ユビキチ <e:1> ラ ラ ゲ-スである. E6-ap と ウ ス スE6と co-に cancer suppressor progeny 伝 P53をユビキチ immunized cancer へと lead く. Bull protein は Rsp5 ユ ビ キ チ ン ラ イ ゲ - ス と big き な complex を form し て い る が, パ ル ス チ ェ イ ス be 験 に よ り Bull protein は Rsp5 protein の タ ー ゲ ッ ト protein で は な く, regulating factor と exam え て い る. ユ ビ キ チ ン 経 road の eventually ス テ ッ プ の complex 雑 な matrix know と activeness regulator の interpret を め ざ し, ま ず, yeast rsp5 temperature sensitivity - different の マ ル チ コ ピ ー サ プ レ ッ サ ー を two 単 from し た. G0 に cell が small さ く な り breathing と masato even し て い る と exam え ら れ て い る WHI2 に つ い て は, さ ら に, 2 - ハ イ ブ リ ド method に よ り WHI2 と complex を form す る protein の heritage 伝 son を 単 from し た. ゲ ノ ム デ ー タ ベ ー ス 検 cable に よ り, phase gay の あ る posthumous son 伝 を PCR method に よ り 単 from し た. こ れ ら の heritage 伝 son broken 壊 strains は 単 alone で は phenotype が 観 examine で き な い が, now, 2 broken 壊 strains を made す る こ と を try み each other, but the latter's 伝 の masato を and Ming ら か に す る designated で あ る. Youdaoplaceholder0 う one kind of <s:1> う チコピ チコピ チコピ サプレッサ サプレッサ Ast1 シャペロ シャペロ シャペロ <s:1> sample に に て て る る シャペロ シャペロ チコピ れな know れな に. さ ら に, Rsp5 と complex を form し て い る Bull protein が ユ ビ キ チ ン ラ イ ゲ - ス の adjustment factor で あ る な ら, ユ ビ キ チ ン change へ 伝 da 経 road が の signal す る は ず で あ る. The wild and mutant strains of the wild are に more tolerant than the て, ロロフォ, ムに and であった.

项目成果

宇津木孝彦: "ユビキチン化と細胞周期" 蛋白質核酸酵素. 41・12. 1826-1832 (1996)

Takahiko Utsugi：“泛素化和细胞周期”蛋白质核酸酶41・12（1996）。

八代田英樹: "ユビキチンリガーゼの分子多様性" 細胞工学. 15・7. 907-917 (1996)

八代秀树：“泛素连接酶的分子多样性”《细胞工程》15・7（1996）。

H.Yashiroda: "Bul1,a new protein that binds to the Rsp5 ubiquitin ligase in Saccharomyces cerevisiae." Mol.Cell.Biol.16・7. 3255-3263 (1996)

H. Yashiroda：“Bul1，一种与酿酒酵母中的 Rsp5 泛素连接酶结合的新蛋白质。”Mol.Cell.Biol.16·7 (1996)。