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植物と酵母における液胞形態形成及び液胞タンパク質輸送に関与する遺伝子の取得と解析

植物和酵母液泡形态发生和液泡蛋白运输相关基因的获取和分析

基本信息

批准号：
10219205
负责人：
竹川薫
金额：
$ 23.3万
依托单位：
Kagawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年、分裂酵母の全ゲノム塩基配列が明らかにされた。そこで分裂酵母全ゲノムのデータから以下の遺伝子を同定して機能解析を行った。(1)分裂酵母の全ゲノムから出芽酵母の液胞タンパク質輸送に関与するVPS遺伝子と相同性の高い遺伝子を同定して、これらの遣伝子破壊株を50以上作成した。多くの破壊株で液胞タンパク質が細胞表層へとミスソートしていることを確認出来たが、全く表現型を示さない株も見いだされ、出芽酵母との相違点を明らかにすることが出来た。(2)分裂酵母の液胞局在ATPアーゼの欠損株を取得した。本破壊株は液胞の酸性化に欠損を示し、液胞タンパク質輸送やエンドサイトーシスなどの細胞内タンパク質輸送経路に欠損を示すことを明らかにした。(3)分裂酵母の小胞輸送に関与する16個の全SNAREタンパク質をコードする遺伝子を単離して、機能解析を行った。その結果、出芽酵母のどのSNAREとも高い相同性を示さないSPAC6F12.03C遺伝子破壊株が液胞タンパク質を細胞表層へとミスソートすることを明らかにした。(4)分裂酵母の液胞の融合に関与するタンパク質の同定を試みた。その結果、出芽酵母のVPS16とVPS33と相同性の高い分裂酵母遺伝子破壊株は液胞形態形成に欠損を示すが、VPS11やVPS18ホモログ遺伝子破壊株は液胞形態に欠損を示さないことがわかり、出芽酵母との相違点を明らかにすることが出来た。(5)分裂酵母のエルゴステロール合成に欠損を示す株を単離し、解析を行った。その結果エルゴステロール欠損株は液胞の融合が起こらないことがわかり、ステロールの液胞形態形成への関与が強く示唆された。

In the past year, the whole genome of the yeast has been cloned. The analysis of the function of the following genes is carried out. (1)The total number of yeast cells in the budding yeast cell is related to the quality of the VPS gene and the high identity of the gene. Many of the cells in the cell surface were identified, and the whole phenotype was identified. The budding yeast was identified. (2)The cell division of the yeast was achieved in ATP failure. The present invention relates to a method for detecting a deficiency in the acidity of a cell, a deficiency in the intracellular transport pathway of a cell, and a deficiency in the cellular transport pathway. (3)16 complete SNARE genes related to cell transport in yeast As a result, the SNARE of budding yeast is highly identical to that of SPAC6F12.03C, which is the first strain to be isolated from the cell surface. (4)The fusion of yeast cells is related to the identity of the cell. As a result, VPS16 and VPS33 of budding yeasts showed a high degree of identity in cell morphology, VPS11 and VPS18 showed a high degree of identity in cell morphology, and VPS 16 and VPS 33 showed a high degree of identity in cell morphology. (5)The yeast is divided into two parts: one part is isolated and the other is analyzed. As a result, the fusion of cells in the damaged plants was initiated, and the formation of cell morphology was closely related to the formation of cell morphology.