藻類の有性生殖で機能する走化性フェロモンの検出・単離と生化学的解析

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Closterium pslcが接合相手とペアを形成するためには、それに先立ち栄養細胞から配偶子嚢細胞への分化をすることが必要である。これまでに、有性生殖特異的細胞分裂(有性分裂)による配偶子嚢細胞への分化を確認しており、実際にその過程を誘起する生理活性物質の検出・特性解析にも成功した。これらをふまえ、今年度は以下の解析を行った。1)有性分裂を誘導する活性物質の分子生物学的解析有性分裂を誘起する生理活性物質について精製を試みたところ、既知の性フェロモン(PR-IP inducer)と熱安定性、作用に対する光要求性、フェロモン産生条件、分子量などの点において高い類似性が見られたことから、両者の関係を検討するため、酵母を用いて組換え型PR-IP inducerを産生した。組換え型性フェロモンは、PR-IP産生誘導、有性分裂誘起の二つの生理活性を示したが、活性の誘導に必要な時間は異なっており、一つのフェロモンが、異なる誘導機構で複数の生理活性を担っていることが明らかになった。2)不溶性多糖物質の分泌を誘起する性フェロモンの解析+型と-型の細胞を混合すると、細胞の周囲に粘液多糖物質が多量に分泌され、ペア形成促進に働くことがこれまでに示唆されているが、この多糖分泌に関わる生理活性物質を、接合相手の細胞の培養液中に検出し、粗精製を行った。