慢性関節リウマチの疾患感授性遺伝子解析

类风湿关节炎疾病易感基因分析

• 批准号: 14013004
• 负责人: 堤 明人
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14013004/
• 关键词: 関節リウマチ; 遺伝子発現; サブトラクション; トリステトラプロリン

1)Differential display PCR(DD-PCR)法により、関節リウマチ(RA)患者滑膜に高発現している遺伝子候補としてtristetraprolin(TTP)をすでにあげていたが、リアルタイムPCR法により、RA関節滑膜24検体、変形性関節症(OA)関節滑膜21検体で遺伝子発現を比較したところ、RA関節滑膜で発現が有意に高度であった。さらに、TNFαの遺伝子発現に比較してTTPの遺伝子発現が低い患者ではRAの活動性の指標の一つであるCRPが高い傾向が見られ、TTP遺伝子発現とRAの活動性との間に関連があることが示唆された。2)In-gel competitive reassociation(IGCR)法により、二つの組織間の遺伝子発現のサブトラクションを行い、一方の組織で発現が亢進していると思われる遺伝子を選別することが可能となった。3)IGCR法により、RA患者関節滑膜とOA患者関節滑膜の遺伝子発現を比較した。OA由来cDNAをdriver、RA由来cDNAをtesterとしてサブトラクションを実施した結果得られたライブラリーのうち、300bp以上のものをクローニングし、70個についてシークエンスを行った。その結果、33個の既知の遺伝子、6個の未知の遺伝子を確認した。順次リアルタイムPCR法によりRA、OA関節滑膜間の遺伝子発現を比較する予定である。4)一方がRAであり、他方が健常である一卵性双生児2組の末梢血由来血球細胞より、ゲノムDNA、cDNAを作成し、それぞれIGCR法によりサブトラクションを行った。ゲノムDNA間の比較では明確な差異は認められなかった。一方、cDNA間の比較では、シークエンスにより、kinase関連・炎症関連遺伝子等が認められ、これらについて解析を実行中である。

1)Differential display PCR method (DD - PCR) に よ り, masato リ ウ マ チ (RA) synovial に 発 high current し て い る heritage 伝 son alternate と し て tristetraprolin (TTP) を す で に あ げ て い た が, リ ア ル タ イ ム PCR method に よ り, RA synovial masato section 24 検, - morphic masato knot section masato synovial 21 検 body (OA) で heritage 伝 発 を now comparing し た と こ ろ, RA masato synovial で 発 now が intentionally に highly で あ っ た. さ ら に, traces of TNF alpha の 伝 発 に now comparing し て TTP の heritage 伝 child patients with low 発 now が い で は RA の active の index の a つ で あ る CRP が high い tendency が see ら れ, TTP but 伝 発 と RA の now active と の between に masato even が あ る こ と が in stopping さ れ た. 2) - gel In competitive reassociation method (IGCR) に よ り, two つ の organizations の posthumous son 伝 発 is の サ ブ ト ラ ク シ ョ ン を い, one party の organization で 発 now が hyperthyroidism し て い る と think わ れ る posthumous son 伝 を choose don't す る こ と が may と な っ た. 3)IGCR method によ によ, RA patients' synovial membrane と, OA patients' synovial membrane cultural heritage 伝 suboccurrence を comparison た. OA origin cDNA を driver, RA origin cDNA を tester と し て サ ブ ト ラ ク シ ョ ン を be applied し た results have ら れ た ラ イ ブ ラ リ ー の う ち, more than 300 bp の も の を ク ロ ー ニ ン グ し, 70 に つ い て シ ー ク エ ン ス を line っ た. Youdaoplaceholder0 そ results, 33 known relics of the blocks 伝 sub-pieces, 6 unknown relics of the blocks 伝 sub-pieces を confirmed た. Sequence: リア, タ, ム, ム, PCR method: によ, <s:1>. Occurrence of cultural heritage 伝 between the synovial membranes of RA and OA joints: を. Comparison: する. Determined: である. 4) one party が RA で あ り, fang が health often で あ る one egg twins where two groups の sex origin blood cells in peripheral blood よ り, ゲ ノ ム DNA and cDNA を し, consummate そ れ ぞ れ IGCR method に よ り サ ブ ト ラ ク シ ョ ン を line っ た. Youdaoplaceholder0 comparison of the <s:1> between DNA で で to clarify な differences <e:1> to recognize められな った った. Party, comparison の cDNA で は, シ ー ク エ ン ス に よ り, kinase masato, even inflammation, masato even heritage 伝 child such as が recognize め ら れ, こ れ ら に つ い て parsing を be line で あ る.

项目成果

Murata H, et al.: "T cell receptor repertoire of T cells in the kidneys of patients with lupus nephritis"Arthritis and Rheumatism. 46(8). 2141-2147 (2002)

Murata H 等人：“狼疮性肾炎患者肾脏中 T 细胞的 T 细胞受体库”关节炎和风湿病。

Tsutsumi A, et al.: "Mannose binding lectin gene polymorphism in patients with type I diabetes"Human Immunology. (in press).

Tsutsumi A 等人：“I 型糖尿病患者的甘露糖结合凝集素基因多态性”人类免疫学。

Yasuda S, et al.: "Gene polymorphisms of tissue plasminogen activator and plasminogen activator inhibitor-1 in patients with antiphospholipid antibodies"Journal of Rheumatology. 29(6). 1192-1197 (2002)

Yasuda S 等人：“抗磷脂抗体患者组织纤溶酶原激活剂和纤溶酶原激活剂抑制剂-1 的基因多态性”风湿病杂志。

Yasukouchi T, et al.: "Evaluation of the improvement of IGCR technique"Nucleic Acids Research. suppl.2. 199-200 (2002)

Yasukouchi T 等人：“IGCR 技术改进的评估”核酸研究。

Ohnishi Y, et al.: "T cell epitopes of type II collagen in HLA-DRB1^*0101 and DRB1^* 0405 positive Japanese patients with rheumatoid arthritis"International Journal of Molecular Medicine. 11(3). 331-335 (2002)

Ohnishi Y等人：“HLA-DRB1^*0101和DRB1^*0405阳性日本类风湿性关节炎患者中II型胶原的T细胞表位”国际分子医学杂志。