X染色体不活性化における機能的RNAと de novoメチル化酵素の相互作用

X染色体失活中功能性RNA和从头甲基转移酶的相互作用

• 批准号: 14014254
• 负责人: 佐渡 敬
• 金额: $ 3.39万
• 依托单位: National Institute of Genetics
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14014254/
• 关键词: X染色体不活性化; DNAメチル化; マウス胚; de novo DNAメチル化酵素; エピジェネティクス

(1)テトラサイクリンによるDnmt3a, Dnmt3bの発現誘導系をde novoメチル化酵素欠損ES細胞へ導入することはできた.しかし,これらの酵素の発現を誘導しても,Xistプロモーターにおけるメチル化の回復は認められなかった.また,分化誘導後Xistを異所的に発現している状況でDnmt3a, Dnmt3bを誘導しても,X染色体不活性化よると思われる細胞死は引き起こされなかった.したがって,Dnmt3a, Dnmt3bはXistの発現制御のみならず,X染色体全域に結合した後のプロセスにも必要であるという当初の仮説は適切ではなかったと思われる.むしろ,X染色体不活性化が細胞分化と密接に関わっていることを考えると,de novoメチル化酵素欠損ES細胞では,異所的なXistの発現は不活性化を誘導するのに重要な分化段階を経過してから起こったため,染色体の不活性化には至らなかったのではないかと考えている.(2)Dnmt3a/Dnmt3b二重欠損マウス胚におけるX染色体不活性化を解析した.雌の正常マウス胚では二者択一的にメチル化されているXistプロモーター領域が,Dnmt3a/Dnmt3b二重欠損マウス胚では極端に低メチル化状態になっているにもかかわらず,大多数の細胞においてXistのディファレンシャルな発現は影響を受けていなかった.また,不活性化も細胞分化にともない正常に進行すると思われた.これらは,Dnmt3aおよびDnmt3bがX染色体不活性化の開始と不活性状態の染色体全体への伝播に必須ではないことを示している.また,不活性化の開始にはXistのmonoallelicな発現亢進が重要であるが,今回の解析からDnmt3a/Dnmt3bによるXistプロモーターの二者択一的なde novoメチル化がそれを担う最初のイベントではないことも強く示唆された.

(1)テトラサ テトラサ リ リ によるDnmt3a The induction system for Dnmt3b is をde Novo メ チ ル the enzyme owe loss ES cells へ import す る こ と は で き た. し か し, こ れ ら の enzyme の 発 now を induced し て も, Xist プ ロ モ ー タ ー に お け る メ チ ル change の reply は recognize め ら れ な か っ た. ま た, after induction Xist を vision of に 発 now し て い る condition で Dnmt3a, Dnmt3b を induced し て も, X chromosome activeness よ る と think わ れ る cell death は led き up こ さ れ な か っ た. し た が っ て, Dnmt3a, Dnmt3b は Xist の 発 now suppression の み な ら ず, global に combined with X chromosome し た after の プ ロ セ ス に も necessary で あ る と い う had の 仮 said は appropriate で は な か っ た と think わ れ る. む し ろ, X chromosome not activeness が cell differentiation と contact に masato わ っ て い る こ と を exam え る と, DE Novo メ チ ル the enzyme owe loss ES cells で は, variations of な Xist の 発 は now no activation induced す を る の に important な differentiation Duan Jie を 経 too し て か ら up こ っ た た め, chromosome の not activeness に は to ら な か っ た の で は な い か と exam え て い る. (2) Dnmt3a/Dnmt3b double owe loss マ ウ ス embryo に お け る X chromosome inactivation を analysis of た. Normal female の マ ウ ス embryo で は 択 between them the に メ チ ル change さ れ て い る Xist プ ロ モ ー タ が ー areas, Dnmt3a/Dnmt3b double owe loss マ ウ ス embryo で は extreme low に メ チ ル change state に な っ て い る に も か か わ ら ず, most の cells に お い て Xist の デ ィ フ ァ レ ン シ ャ ル な 発 now は を by け て い な か っ た. ま た, no activation も cell differentiation に と も な on normal に い す る と think わ れ た. こ れ ら は, Dnmt3a お よ び Dnmt3b が X chromosome activeness の start と not active の chromosome all へ の 伝 sowing に must で は な い こ と を shown し て い る. ま た, not start activeness の に は Xist の mon Oallelic な 発 hyperthyroidism が now important で あ る が, today back to の parsing か ら Dnmt3a/Dnmt3b に よ る Xist プ ロ モ ー タ ー の 択 between them the な DE novo メ チ ル change が そ れ を bear う initially の イ ベ ン ト で は な い こ と も く and shown strong sucking さ れ た.

项目成果

Sado et al.: "Effct of Tsix disruption on Xist expression in male ES cells"Cytogenetics and Genome Research. (in press).

Sado 等人：“Tsix 破坏对雄性 ES 细胞中 Xist 表达的影响”细胞遗传学和基因组研究。