マウス胚発生におけるDNAメチル化の意義

点击翻译按钮获取中文摘要

本研究課題では、ほ乳類発生に不可欠であるX染色体不活性化におけるDNAメチル化の意義を調べるために、その触媒酵素である3種類のDNAメチル化酵素Dnmt1,Dnmt3a,およびDnmt3bの欠損マウス、およびES細胞を材料に研究を行ってきた。Dnmt1ノックアウトマウス胚における染色体複製時期を観察した結果、今後さらに解析が必要であるものの、胎仔が死亡する頃には不活性X染色体のみならず全ての染色体の複製時期が異常になっている可能性が示唆された。また、当初計画していたDnmt1のコンディショナルノックアウトマウスに関しては、ターゲティングに成功したES細胞を用いて多数のキメラマウスを作製したものの、いまだノックアウトマウスの誕生には至っていない。Dnmt3a,Dnmt3bの各欠損ES細胞を用いた解析から、これらの細胞ではX染色体不活性化の過程に異常は生じていないと考えられた。しかし、両者の二重欠損ES細胞においては分化誘導後、不活性化の開始に不可欠なXist遺伝子が異所的に発現されることが分かった。ところが、X染色体連鎖遺伝子の発現解析から、X染色体の不活性化には至っていないことが示唆された。これらの結果は、X染色体不活性化にはXistの発現に引き続き、Dnmt3a,Dnmt3bの機能が関わるプロセスが必要であることを示唆している。