权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

マウス胚発生におけるDNAメチル化の意義

DNA甲基化在小鼠胚胎发育中的意义

基本信息

批准号：
12740414
负责人：
佐渡敬
金额：
$ 1.41万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究課題では、ほ乳類発生に不可欠であるX染色体不活性化におけるDNAメチル化の意義を調べるために、その触媒酵素である3種類のDNAメチル化酵素Dnmt1,Dnmt3a,およびDnmt3bの欠損マウス、およびES細胞を材料に研究を行ってきた。Dnmt1ノックアウトマウス胚における染色体複製時期を観察した結果、今後さらに解析が必要であるものの、胎仔が死亡する頃には不活性X染色体のみならず全ての染色体の複製時期が異常になっている可能性が示唆された。また、当初計画していたDnmt1のコンディショナルノックアウトマウスに関しては、ターゲティングに成功したES細胞を用いて多数のキメラマウスを作製したものの、いまだノックアウトマウスの誕生には至っていない。Dnmt3a,Dnmt3bの各欠損ES細胞を用いた解析から、これらの細胞ではX染色体不活性化の過程に異常は生じていないと考えられた。しかし、両者の二重欠損ES細胞においては分化誘導後、不活性化の開始に不可欠なXist遺伝子が異所的に発現されることが分かった。ところが、X染色体連鎖遺伝子の発現解析から、X染色体の不活性化には至っていないことが示唆された。これらの結果は、X染色体不活性化にはXistの発現に引き続き、Dnmt3a,Dnmt3bの機能が関わるプロセスが必要であることを示唆している。

The purpose of this study is to investigate the significance of X chromosome inactivation in breast development, and to study the catalytic enzymes of three types of DNA methylation enzymes Dnmt1, Dnmt3a, Dnmt3b and ES cells. Dnmt1: The time of chromosome duplication in embryos was observed. The results showed that future analysis was necessary. The fetus died. The inactive X chromosome was detected. The time of chromosome duplication in embryos was abnormal. When the initial design of Dnmt1 is completed, the ES cell is used to control the number of times it is generated. Dnmt3a, Dnmt3b each defective ES cell use analysis, this cell is X chromosome inactivation process abnormal generation After induction of differentiation, inactivation and differentiation of ES cells, the development of Xist cells is not possible. X-linked gene expression analysis, X-chromosome inactivation, and X-linked gene expression analysis. As a result, X chromosome inactivation is necessary for the development of Xist, Dnmt3a and Dnmt3b.