パラミクソウイルスの膜融合蛋白の機能およびそれを制御する宿主細胞因子に関する研究

副粘病毒膜融合蛋白的功能及其控制宿主细胞因子的研究

• 批准号: 14021042
• 负责人: 鶴留 雅人
• 金额: $ 2.69万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14021042/
• 关键词: パラミクソウイルス科; シミアンウイルス5; 細胞融合; F蛋白; 構造変化; モノクローナル抗体; エンドサイトーシス; コレステロール

既に報告したように、SV5 WR株のF蛋白(WR-F)の22番目のLeu.をProに変えた変異F蛋白(L22P)は、HN蛋白非依存性の細胞融合誘導能を示す。また、L22P発現HeLa細胞には36kDaの蛋白が出現するが、WR-F発現細胞にはこの蛋白が検出されない。[成績]1.細胞表面に発現したL22Pはエンドサイトーシスされてライソソームに移動し、そこで分解されることにより、L22PのF1のN末側に由来する36kDaおよびC末側に由来する15kDaの蛋白が生じることを明らかにした。また、L22Pのエンドサイトーシスはコレステロール依存性であり、L22PがF1とF2に解裂していることが必要であった。一方、WR-Fのエンドサイトーシスは認められなかった。2.WR-F発現細胞を47℃で熱処理すると、HN蛋白非依存性の細胞融合が誘導され、WR-Fがエンドサイトーシスされることを見い出した。この処理によりWR-Fに抗L22P抗体(mAb 21-1)のエピトープが露出した。[考察]WR-Fは熱処理によりpostfusion conformationへと構造変化することが示唆された、同時にエンドサイトーシス、mAb21-1のエピトープの露出が起こることから、融合した細胞膜に挿入されているfusion peptideがコレステロールと結合し、これがエンドサイトーシスのシグナルになるものと推論した。またこの構造変化はmAb21-1のエピトープの存在するhead regionに生じるものと考えられる。一方、L22Pではこのエピトープが解裂前から露出しているが、このためにpostfusion conformationへと構造変化を起こしやすく、37℃でもHN蛋白非依存性の細胞融合能を示すものと結論した。以上の結果を論文にまとめ、投稿した。

The に report indicates that the たように たように, SV5 WR strain <s:1> F protein (WR-f) <s:1> 22 suborder <s:1> Leu, をProに variant えた variant F protein (L22P) す, and HN protein-independent <s:1> cell fusion induction can を show す. ま た, L22P 発 now HeLa に は 36 kda protein の が appear す る が, WR - F 発 now cells に は こ の protein が 検 out さ れ な い. 1. [results] the cell surface に 発 now し た L22P は エ ン ド サ イ ト ー シ ス さ れ て ラ イ ソ ソ ー ム に mobile し, そ こ で decomposition さ れ る こ と に よ り, L22P の F1 at the end of the の N side に origin す る 36 kda お よ び C at the end of the lateral に origin す る 15 kda protein の が raw じ る こ と を Ming ら か に し た. ま た, L22P の エ ン ド サ イ ト ー シ ス は コ レ ス テ ロ ー ル dependency で あ り, L22P と が F1 F2 に splitting し て い る こ と が necessary で あ っ た. One party, WR-F, <s:1> エ ドサ ドサ ト ト シス シス シス <e:1> acknowledges that められな った った った. 2. WR -f 発 cell を now 47 ℃ で hot 処 Richard す る と, HN protein than dependence induced cell fusion が の さ れ, WR - F が エ ン ド サ イ ト ー シ ス さ れ る こ と を see い out し た. <s:1> process によ <s:1> r-f に anti-l22p antibody (mAb 21-1) <s:1> エピト プが プが プが expose <s:1> た. [investigation] WR -f は hot 処 Richard に よ り postfusion conformation へ と structure - the す る こ と が in stopping さ れ た, at the same time に エ ン ド サ イ ト ー シ ス, mAb21-1 の エ ピ ト ー プ の reveal が up こ る こ と か ら, fusion し た membrane に scions into さ れ て い る fusion Peptide が コ レ ス テ ロ ー ル と し, こ れ が エ ン ド サ イ ト ー シ ス の シ グ ナ ル に な る も の と inference し た. ま た こ の structure - the は mAb21-1 の エ ピ ト ー プ の is す る head region に raw じ る も の と exam え ら れ る. Side, L22P で は こ の エ ピ ト ー プ が before splitting か ら reveal し て い る が, こ の た め に postfusion conformation へ と structure - the を up こ し や す く, 37 ℃ で も HN protein cell fusion can not dependence の を shown す も の と conclusion し た. The above <s:1> results を paper にまとめ and submission た た.

项目成果

Morihiro Ito: "Up-regulated expression of a novel gene in activated human peripheral blood mononuclear cells that is a truncated paralog of the human system L-amino acid transporter 1"International Journal of Biochemistry and Cell Biolology. Vol.34. 1152-

Morihiro Ito：“激活的人外周血单核细胞中一种新基因的表达上调，该基因是人类系统 L-氨基酸转运蛋白 1 的截短旁系同源物”国际生物化学和细胞生物学杂志。

Noriki Miyamoto: "Human osteosarcoma-derived cell lines produce soluble factor(s) that induces differentiation of blood monocytes to osteoclast-like cells"International Immunopharmacology. Vol.2. 25-38 (2002)

Noriki Miyamoto：“人骨肉瘤衍生细胞系产生可溶性因子，诱导血液单核细胞分化为破骨细胞样细胞”国际免疫药理学。

Yoko Okamoto: "Expression and regulation of 4F2hc and hLAT1 in human trophoblasts"American Journal of Physiology Cell Physiology. Vol.282. C196-C204 (2002)

Yoko Okamoto：“4F2hc 和 hLAT1 在人类滋养层中的表达和调节”美国生理学细胞生理学杂志。