補体レクチン経路の自然免疫における役割と活性化機構

补体凝集素途径在先天免疫中的作用及激活机制

• 批准号: 14021106
• 负责人: 松下 操
• 金额: $ 3.71万
• 依托单位: Tokai University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14021106/
• 关键词: 補体; レクチン; セリンプロテアーゼ; MASP; MBL; ficolin; ジーンターゲッティング; 自然免疫

マンノース結合レクチン(MBL)やフィコリンは自然免疫において重要な働きをしていることから生体防御レクチンと呼ばれている。ヒト血清中のMBLやフィコリン(L-ficolin/P35と博多抗原)には補体成分のC1r, C1s様構造を持つセリンプロテーゼMASP(MASP-1,MASP-2,MASP-3)と低分子量蛋白sMAPが結合している。MASP-3はMASP-1遺伝子の、またsMAPはMASP-2遺伝子のスプライシングバリアントである。MBLやフィコリンが一旦細菌等の糖鎖へ結合すると、MASPによりC2,C3,C4が分解され、補体レクチン経路が活性化される。レクチン経路は生体防御や、一方で病態とも関係していると推定されるがその詳細は不明である。そこで、本研究ではMASP-1/-3や、MASP-2/sMAPのノックアウトマウスを用いてレクチン経路の生体内での意義を明らかにする。また、マウスのレクチン経路を解析することにより、未だ不明な活性化機構の全体像の解明を目指す。次の成果が得られた。(1)ジーンターゲッティーング法により作製したMASP-1,MASP-3ホモ型欠損マウス(以下、Masp-1/3(-/-))の血清から部分精製したMBL-MASP複合体にはMASP-2とsMAPが含まれているが、Masp-1/3(-/-)血清をマンナンと反応させると、MASP-2の活性化がMasp-1/3(+/+)血清に比べて低下していることがわかった。この系において、Masp-1/3(-/-)血清にヒトMASP-1/3を添加すると、Masp-1/3(+/+)血清による活性化のレベルまで回復した。また、Masp-1/3(-/-)においてMBL-A, MBL-C共にMasp-1/3(+/+)に比べて低値を示した。(2)マウス血清よりN-アセチルグルコサミン(GlcNAc)-アガロース等を用いてficolin-Aを部分精製した。MonoQ上、ficolin-A画分に一致してMASP-1,MASP-2とsMAPが含まれていた。ficolin-AとMASPs/sMAPとの結合はカルシウムイオン依存性であり、複合体はGlcNAcに結合するとC4を活性化したことから、マウスのficolin-Aもヒトのficollinと同様にMASPとの複合体としてレクチン経路を活性化することが明らかになった。

The combination of MBL and natural immunity is very important. The MBL protein (L-ficolin/P35 and Bodo antigen) in serum is associated with complement components C1r, C1s, MASP(MASP-1,MASP-2,MASP-3) and low molecular weight protein sMAP. MASP-3 is a variant of MASP-1. MAP is a variant of MASP-2. MBL and MASP are decomposed and the complement pathway is activated once the carbohydrate is bound by bacteria and the like. The biological defense of a person is not clear. In this study, MASP-1/-3 and MASP-2/sMAP were used to clarify the biological significance of MASP-1/-3 and MASP-2/sMAP. The whole picture of the active mechanism is explained in detail. The results of the second round were obtained. (1)MASP-1,MASP-3, MASP-3, MASP-1,MASP-2,MASP-3, MASP-1,MASP-3, MASP-3, MASP-2, MASP-1, MASP-3, MASP-3, MASP-2, MASP-3, MASP, MASP This is the result of the addition of MASP-1/3 and Masp-1/3(+/+) serum. MBL-A, MBL-C Masp-1/3(+/+) is lower than MBL-A. (2)The serum was purified with ficolin-A. MonoQ and ficolin-A are identical to MASP-1,MASP-2 and sMAP. Ficolin-A and MASPs/sMAP are bound to C4 and activated to C4.

项目成果

Endo Yuichi: "Origin of mannose-binding lectin-associated serine protease (MASP)-1 and MASP-3 involved in the lectin complement pathway traced to the invertebrate, amphioxus"Journal of Immunology. (印刷中). (2003)

Endo Yuichi：“甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶 (MASP)-1 和 MASP-3 参与无脊椎动物文昌鱼的凝集素补体途径”，《免疫学杂志》（2003 年出版）。

Kuraya Mikio: "Expression of H-ficolin/Hakata antigen, and mannose-binding lectin-associated serine protease (MASP)-1, and -3 by human glioma cell line T98G"International Immunology. 15. 109-117 (2003)

Kuraya Mikio：“人神经胶质瘤细胞系 T98G 表达 H-ficolin/Hakata 抗原和甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶 (MASP)-1 和 -3”国际免疫学。

Satomura, A: "Significant elevations in serum mannose-binding lectin levels in patients with chronic renal failure"Nephron. 92. 702-704 (2002)

Satomura，A：“慢性肾功能衰竭患者血清甘露糖结合凝集素水平显着升高”肾单位。

Endo Yuichi: "Functional characterization of human mannose-binding lectin-associated serine protease (MASP)-1/3 and MASP-2 promoters, and comparison with the Cls promoter"International Immunology. 14. 1193-1201 (2002)

Endo Yuichi：“人甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶 (MASP)-1/3 和 MASP-2 启动子的功能表征，以及与 Cls 启动子的比较”国际免疫学。

Zhao L: "LPS-induced platelet response and rapid shock in mice : contribution of O-antigen region of LPS and involvement of the lectin pathway of the complement system"Blood. 100. 3233-3239 (2002)

赵立：“LPS诱导的小鼠血小板反应和快速休克：LPS O抗原区的贡献和补体系统凝集素途径的参与”血液。