補体レクチン経路の自然免疫における役割と活性化機構

补体凝集素途径在先天免疫中的作用及激活机制

• 批准号: 13226106
• 负责人: 松下 操
• 金额: --
• 依托单位: Fukushima Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13226106/
• 关键词: 補体; レクチン; 自然免疫; MASP; ノックアウトマウス; 国際研究者交流; デンマーク

血清中に存在するマンノース結合レクチン(MBL)やフィコリンは自然免疫に働くレクチンである。ヒトMBLとフィコリンにはC1r,C1s様構造を持つセリンプロテアーゼMASP(MASP-1,MASP-2,MASP-3)と低分子量蛋白sMAPが結合している。MASP-3はMASP-1遺伝子の、また、sMAPはMASP-2遺伝子のスプライシングバリアントである。MBLやフィコリンが一旦細菌等の糖鎖へ結合するとMASPにより補体成分が分解され補体レクチン経路が活性化される。レクチン経路は生体防御や、一方で病態とも関係していると推定されているがその詳細は不明である。本研究ではMASPのノックアウトマウスを用いてレクチン経路の生体内での意義を明らかにすることと、マウスのレクチン経路を解析して、未だ不明な活性化機構の全体像の解明を目指し、以下の成果を得た。ジーンターゲッティング法により、マウスMASP-1/-3遺伝子の第2エクソンを欠落した遺伝子改変マウス(Masp-1(+/-)と略)を作製し、更にMasp-1(+/-)同士の交配により両染色体に遺伝子変異を持つホモ型MASP-1欠損マウス(以下、Masp-1(-/-))を得た。Masp-1(-/-)はMASP-1とMASP-3をどちらも欠損していた。Masp-1(-/-)は成長遅延が見られる以外は、外見的にも組織学的にも異常を示さなかった。Masp-1(-/-)は野生型マウスに比べてインフルエンザウイルス感染で死亡しやすい傾向を示した。Masp-1(-/-)血清からマンナン-アガロースを用いてMBL-MASP複合体を部分精製して解析したところ、MASP-2とsMAPが含まれていた。また、Masp-1(-/-)血清を37℃でマンナン-アガロースと反応させるとMASP-2は活性化されるが、0℃では活性化されないことがわかった。マウス血清よりN-アセチルグルコサミン(GlcNAc)-アガロースを用いてGlcNAc溶出によりフィコリンの一つであるficolin-Aを部分精製し、更にMono Qで分画したところficolin-A画分に一致してMASP-2とsMAPが含まれていた。

In the serum, there was a combination of antigens and antigens (MBL), and the natural immunity was not known. The combination of low molecular weight protein MASP (MASP-1,MASP-2,MASP-3) and low molecular weight protein (sMAP) was induced by the combination of low molecular weight protein (MASP-1,MASP-2,MASP-3) and low molecular weight protein (sMAP). MASP-3

项目成果

Misao Matsushita: "The role of ficolins in innate immunity"Immunobiology. (印刷中). (2002)

Misao Matsushita：“纤维胶蛋白在先天免疫中的作用”免疫生物学（2002 年）。

Isao Ohsawa: "Cryoprecipitate of Patients with Cryoglobulinemic Glomerulonephritis Contains Molecules of the Lectin Complement Pathway"Clinical Immunology. 101. 59-66 (2001)

Isao Ohsawa：“冷球蛋白血症性肾小球肾炎患者的冷沉淀含有凝集素补体途径的分子”临床免疫学。

Akira Kenjo: "Cloning and characterization of novel fecolins from the solitary ascidian Halocynthia roretzi"Journal of Biological chemistry. 276. 19959-19965 (2001)

Akira Kenjo：“来自孤独海鞘 Halocynthia roretzi 的新型 fecolins 的克隆和表征”生物化学杂志。

Misao Matsushita: "Activation of the lectin complement pathway by H-ficolin (Hakata antigen)"Journal of Immunology. (印刷中). (2002)

Misao Matsushita：“H-ficolin（Hakata 抗原）激活凝集素补体途径”免疫学杂志（2002 年出版）。

Satoshi Hisano: "Mesangial IgA2 deposits and lectin pathway-mediated complement activation in IgA glomerulonephritis"American Journal of Kidney Disease. 38. 1082-1088 (2001)

Satoshi Hisano：“IgA 肾小球肾炎中的系膜 IgA2 沉积和凝集素途径介导的补体激活”美国肾脏病杂志。