内分泌かく乱物質共通の精子形成への作用メカニズム

内分泌干​​扰物对精子发生的共同作用机制

• 批准号: 14042201
• 负责人: 三浦 猛
• 金额: $ 2.69万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14042201/
• 关键词: エストラジオール17β; 11-ケトテストステロン; cDNAサブトラクション; セルトリ細胞; ディファレンシャルスクリーニング; 環境ホルモン; ニホンウナギ; 精子形成; エストラジオール-17β; 精巣器官培養; 精子数減少

昨年度の結果から、1ng/ml以上のエストラジオール17β (E2)と11-ケトテストステロン(11-KT)を同時に添加した場合、p-ノニルフェノールやジエチルスチルベストロール(DBS)等の環境ホルモンと11-KTを同時処理したときと同様、著しいセルトリ細胞の肥大化と、それに伴う生殖細胞数の減少が引き起こされることが明らかとなった。そこで、そのような条件で、精巣で特異的に誘導される遺伝子のクローニングを、cDNAサブトラクション法により試みた。E2を1ng/mlと11-KTを10ng/mlを同時に添加した培養液で15日間培養した精巣と、11-KTを10ng/mlのみを添加した培養液で15日間培養した精巣からそれぞれmRNAを抽出し、それをcDNAに変換した後、cDNAサブトラクションとディファレンシャルスクリーニングによりセルトリ細胞肥大化時に精巣で特異的に発現する遺伝子をクローニングした。その結果E2と11-KTの同時処理により16種類の精巣で発現が変化するcDNAを得ることができた。これらの中には、TDE (Tumor Differentially Expressed Protein)、アトピー性皮膚炎に関係すると考えられるETEA (Expressed in T-cells and Eosinophils in Atopic Dermatitis)およびHDL結合タンパクのVigilin等が含まれていた。これらのcDNAのうち、特にETEAは、E2と11-KTの同時添加で、最も著しくその発現を増大させた。

The result of last year was のエストラジオール17β above 1ng/ml (E2) When 11-ケトテストステロン(11-KT) is added at the same time , p-ノニルフェノールやジエチルスチルベストロール (DBS) and other environmentsルモンと11-KTをsimultaneous treatment of したときと同様, and しいセルトリcell hypertrophy Changes in the number of germ cells caused by the decrease in the number of germ cells.そこで, そのようなconditioned で, sperm でspecific に-induced される缝子のクローニングを, cDNA サブトラクション法によりtestみた. E2を1ng/ml and 11-KTを10ng/ml were added at the same time as culture medium and 15-day culture medium.壣と、11-KTを10ng/mlのみをadded したculture medium で15 day culture したessence 巣からそれぞれm After the RNA was extracted and the cDNA was replaced, the cDNA was extracted and the cDNA was extracted. When the スクリーニングによりセルトリcells become hypertrophic, the specific に発 appear する伝子をクローニングした. As a result, E2 and 11-KT simultaneously processed 16 types of sperm and cDNA. TDE (Tumor Differentially Expressed Protein), TDE (Expressed in T-cells and Eosinophils in Atopic) Dermatitis) およびHDL combined with タンパクのVigilin, etc.これらのcDNAのうち, 特にETEAは, E2と11-KTの are added at the same time, and the final しくその発appears to be a big one.

项目成果

Higashino, T.: "Effects of two sex sterodi hormones on early oogenesis in Japanese huchen(Hucho perryi)."Fish Physiol.Biochem.. (印刷中).

Higashino, T.：“两种性甾体激素对日本 Huchen (Hucho perryi) 早期卵子发生的影响。”Fish Physiol.Biochem..（出版中）。

T.Higashino: "Histological studies on early oogenesis in Berfin flounder (Verasper moseri)"Zool. Sci.. 19(5). 557-563 (2002)

T.Higashino：“Berfin 比目鱼 (Verasper moseri) 早期卵子发生的组织学研究”动物园。

T.Miura: "Spermatogenesis-preventing substance in Japanese eel"Development. 129(11). 2689-2697 (2002)

T.Miura：“日本鳗鱼中阻止精子发生的物质”的开发。

M.Amer: "Studies on the roles of androgen, estrogen and progestin in the early stages of spermatogenesis"Fisheries Sci.. 68(supl.). 681-685 (2002)

M.Amer：“关于雄激素、雌激素和孕激素在精子发生早期阶段的作用的研究”渔业科学 68（增刊）。

T.Higashino: "Effects of 17β-estradiol on oogonial proliferation in fish"Fisheries Sci.. 68(supl.). 1269-1270 (2002)

T.Higashino：“17β-雌二醇对鱼类卵原细胞增殖的影响”渔业科学 68（增刊）（2002 年）。