魚類精子形成関連遺伝子群の発現機構の解析とその作用の検索

鱼类精子发生相关基因表达机制分析及作用探究

• 批准号: 09760169
• 负责人: 三浦 猛
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09760169/
• 关键词: 精子形成; ニホンウナギ; アクチビンB; 精原細胞増殖; 精巣器官培養; 精子形成開始因子; 減数分裂; リーケトテストステロン; PCNA; ヒストンH1; ZP2; ZP3; カテプシンL

cDNAサブトラクション法およびディファレンシャルディスプレー法により得られたウナギの精子形成関連遺伝子群(eel spermatogenesis related substance:eSRS)22クローンのうち、特に分泌性のタンパクであるeSRS1(アクチビンB)の精子形成制御への作用機序を調べた。昨年度に報告したように、eSRS1は、ヒト絨毛性生殖腺刺激ホルモン(HCG)投与により精子形成開始の引き金が引かれた後24時間以内に生殖細胞を取り巻く体細胞:セルトリ細胞に強いmRNAの発現が認めらるようになる因子である。eSRS1のmRNAおよびタンパクの発現は、HCGのみならず精子形成誘起ステロイドである11-ケトテストステロン(11-KT)によっても誘導されることが、生体外精巣器官培養により明らかとなった。このことは、eSRS1が精子形成の制御に深く関わっていることを示している。そこで、この因子の稍子形成への作用機序を直接調べるために、CHO細胞の発現系を利用してeSRS1cDNAから組換体タンパクを作製し、これをウナギの精巣器官培養系に添加し、生殖細胞の発達の有無を形態的に調べた。その結果、eSRS1は精原細胞の増殖分裂を誘導する精子形成開始因子であることが明らかとなった。しかしながら、eSRS1の添加のみの培養精巣片には、後期B型精原細胞よりも発達した生殖細胞は全く認められなかったことより、減数分裂以降の精子形成過程の制御には、eSRS1以外の11-KTによって精巣での発現がコントロールされる何らかの因子が関わるものと推察された。

The cDNA encoding method was used to identify the role of eSRS in the regulation of spermatogenesis. The cDNA encoding method was used to identify the role of eSRS in spermatogenesis. In the last year, we reported that the germ cells were collected within 24 hours after the start of sperm formation and the expression of strong mRNA in somatic cells within 24 hours after HCG administration. The expression of eSRS1 mRNA in vitro is related to the induction of sperm formation by HCG and the induction of sperm formation by 11-KT. This is the first time that eSRS1 has been used to control sperm formation. The mechanism of action of these factors in the formation of germ cells is directly regulated. The development of CHO cells is controlled by the addition of eSRS1 cDNA to the sperm organ culture system. The development of germ cells is regulated by the presence or absence of morphology. As a result, eSRS1 induces spermatogenesis initiation factors in spermatogonia. The development of germ cells in the late B-type spermatogonia and the regulation of meiosis and spermatogenesis in the absence of eSRS1 were investigated.

项目成果

C.Miura,T.Miura,N.Kudo,M.Yamashita and K.Yamauchi: "cDNA cloning of a stage specific gene expressed during HCG-induced spematogenesis in the Japanese eel." Development Growth and Differentiation. (印刷中).

C. Miura、T. Miura、N. Kudo、M. Yamashita 和 K. Yamauchi：“日本鳗鱼 HCG 诱导的精子发生过程中表达的阶段特异性基因的 cDNA 克隆（正在出版）。”

T.Miura: "Spermatogenetic cycle in fish.In:Encyclopedia of Reproduction vol.4." E.Knobil and J.D.Neill,eds.Academic Press,San Diego, 8 (1999)

T.Miura：“鱼类的精子发生周期。见：生殖百科全书第 4 卷。”

J.D.Tan-Fermin, T.Miura, H.Ueda, S.Adachi, K.Yamaguchi.: "Testicular histology and serum steroid hormone profiles in hatchery-bred catfish clarias macrocephalus (Gunther) during an annual reproductive cycle." Fisheries Science. 63. 681-686 (1997)

J.D.Tan-Fermin、T.Miura、H.Ueda、S.Adachi、K.Yamaguchi.：“每年繁殖周期中孵化场培育的鲶鱼 (Gunther) 的睾丸组织学和血清类固醇激素谱。”

J.D.Tan-Fermin,T.Miura,S.Adachi and K.Yamauchi: "Seminal plasma composition,sperm motility,and milt dilution in the Asian catfish Clarias macrocephalus(Gunther)." Aquaculture. 171. 323-338 (1999)

J.D.Tan-Fermin、T.Miura、S.Adachi 和 K.Yamauchi：“亚洲鲶鱼 Clarias macrocephalus (Gunther) 的精浆成分、精子活力和精液稀释度。”

T.Miura, S.Kawamura, C.Miura, K.Yamauchi.: "Impaired spermalogenesis in the Japanese eel,Anguilla japonica Possibility for the existence of factors that regulate entry of germ cells into meiosis." Development,Growth and Differentiation. 39. 685-691 (1997)

T.Miura、S.Kawamura、C.Miura、K.Yamauchi.：“日本鳗鱼精子发生受损，可能存在调节生殖细胞进入减数分裂的因子。”