内分泌撹乱物質の精巣機能障害発現機構の解析

内分泌干​​扰物引起睾丸功能障碍的机制分析

• 批准号: 14042217
• 负责人: 田渕 圭章
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Toyama Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14042217/
• 关键词: トランスジェニックマウス; 温度感受性simian virus 40; 大型T抗原遺伝子; 精巣セルトリ細胞; 内分泌撹乱物質; ビスフェノールA; 遺伝子発現解析; cDNAマイクロアレイ; セルトリ細胞; 内分泌攪乱物質; DNAマイクロアレイ; ERストレス; 細胞障害; chop

温度感受性simian virus40(tsSV40)大型T抗原遺伝子導入トランスジェニック(TG)マウスから,上皮粘液細胞のマーカー遺伝子(ムチンとカテプシンE)を発現する細胞株,上皮粘液細胞と主細胞のマーカー遺伝子(ペプシノーゲンF)を発現する細胞株,および,上皮粘液細胞,主細胞と壁細胞のマーカー遺伝子(H, K-ATPaseα鎖)を発現する上皮様の細胞株が得られた.また,tsSV40大型T抗原遺伝子導入TGラットから正常機能を保持した精巣セルトリ細胞株RTS3-3細胞株の樹立に成功した.精巣セルトリTTE3細胞へのビスフェノールA(BPA)の暴露によりCa^<2+>-ATPase阻害作用に基づく細胞内カルシウム濃度の一過性の上昇に続いて小胞体ストレスが誘導され,時間依存的に細胞障害が惹起された.合計約2,000種類の遺伝子の発現を検討した結果,BPAにより1/2以下に発現量が減少する遺伝子が3種類,2倍以上に増加する遺伝子が39種類同定された.これらの遺伝子は,6,12または24時間に発現量がピークになる3グループに分けられ,各々c-mycとfra-2,オルニチンデカルボキシラーゼ(ODC)およびchopの発現変動が顕著であった.c-mycの転写制御のターゲット遺伝子としてODCやHSC70が報告されている.非常に興味深いことに,c-mycの発現上昇に続いてODCやHSC70の発現増加が観察された.BPAによりc-mycが誘導され,ODCとHSC70の転写活性を上昇させたと考えられる.また,BPAはGRP78,HSP90,chop,酸化ストレス誘導タンパク質,ODC等のストレス関連遺伝子の発現量を顕著に増加させた.近年,BPAにより酸化ストレスや熱ショックタンパク質が誘導されることが動物モデルで相次いで報告された.この様に幾つかの遺伝子発現については,in vivo動物モデルの報告と一致したことから,これらの遺伝子は動物培養細胞システムと動物モデルの間のブリッジングバイオマーカーに成り得る可能性が有る.

Temperature sensitivity simian Virus40 (tsSV40) large T antigen heritage 伝 son import ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク (TG) マ ウ ス か ら, epithelial mucus cells の マ ー カ ー heritage 伝 child (ム チ ン と カ テ プ シ ン E) を 発 now す る cell lines, epithelial mucus cells と main の マ ー カ ー heritage 伝 child (ペ プ シ ノ ー ゲ ン F) を 発 now す る cell lines, お よ び, Epithelial mucus cells, primary cells と wall の マ ー カ ー heritage 伝 child (H, K - ATPase alpha lock) を 発 now す る epithelial others の cell lines が have ら れ た. ま た, tsSV40 large T antigen heritage 伝 son import TG ラ ッ ト か ら normal function を keep し た fine 巣 セ ル ト リ cell lines RTS3-3 cell lines の set に successful し た. Pure 巣 セ ル ト リ TTE3 cells へ の ビ ス フ ェ ノ ー ル A (BPA) の exposed に よ り Ca ^ 2 + > < - ATPase resistance against role に base づ く intracellular カ ル シ ウ ム concentration rising の transient の に 続 い て small cell body ス ト レ ス が induced さ れ, time dependent に cells handicap of が provoked さ れ た. Total about 2000 kinds の heritage 伝 son の 発 を now beg し 検 た results, BPA に よ り 1/2 に 発 now decrease が す る heritage 伝 が 3 kinds, more than 2 times に raised plus す る heritage 伝 son が types of 39 with さ れ た. こ れ ら の heritage 伝 は, 6, 12 ま た は 24 time に 発 now quantity が ピ ー ク に な る 3 グ ル ー プ に points け ら れ, each 々 C - myc と fra - 2, オ ル ニ チ ン デ カ ル ボ キ シ ラ ー ゼ (ODC) お よ び chop の 発 now - move が 顕 the で あ っ た. C - myc の planning write suppression の タ ー ゲ ッ ト posthumous son 伝 と し て ODC や HSC70 が report さ れ て い る. Very deep に tumblers い こ と に, c - myc の 発 now rising に 続 い て ODC や HSC70 の 発 now rights が 観 examine さ れ た. BPA に よ り c - myc が induced さ れ, ODC と HSC70 の planning write activity を rise さ せ た と exam え ら れ る. ま た, BPA は GRP78, HSP90, chop, acidification ス ト レ ス Induced タ, パ, パ, and the occurrence amount of <s:1> ストレス related progeny of ODC, 伝, etc. を顕 に increases させた. In recent years, BPA に よ り acidification ス ト レ ス や hot シ ョ ッ ク タ ン パ ク qualitative が induced さ れ る こ と が animal モ デ ル で phase time い で report さ れ た. こ の others に several つ か の posthumous son 伝 発 now に つ い て は, in Vivo animal モ デ ル の report consistent と し た こ と か ら, こ れ ら の posthumous son 伝 は animal culture cell シ ス テ ム と animal モ デ ル の between の ブ リ ッ ジ ン グ バ イ オ マ ー カ ー に into り が have る る possibility.

项目成果

Tabuchi, Y., Kondo, T.: "cDNA microarray analysis reveals chop-10 plays a key role in Sertoli cell death induced by bisphenol A"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 305. 54-61 (2003)

Tabuchi, Y., Kondo, T.：“cDNA 微阵列分析表明，chop-10 在双酚 A 诱导的支持细胞死亡中发挥着关键作用”Biochem.Biophys.Res.Commun.. 305. 54-61 (2003)

Tabuchi, Y.et al.(5 authors): "Identification of genes responsive to sodium butyrate in mouse colonic cells"Biochem Biophys. Res. Commun.. 293. 1287-1294 (2002)

Tabuchi, Y. 等人（5 位作者）：“小鼠结肠细胞中对丁酸钠敏感的基因的鉴定”Biochem Biophys。

Tabuchi Y.et al.(4 authors): "Establishment of the conditionally immortalized testicular Sertoli cell line RTS3-3 from transgenic rats harboring temperature-sensitive simian virus 40 large T-antigen gene"Cell Struct.Funct.. 28. 87-95 (2003)

Tabuchi Y.等人（4 位作者）：“从携带温度敏感猿病毒 40 大 T 抗原基因的转基因大鼠中建立条件永生化睾丸支持细胞系 RTS3-3”Cell Struct.Funct.. 28. 87-

Tabuchi, Y.et al.(3 authors): "DNA microarray analysis of differentially expressed genes responsive to bisphenol A, an alkylphenol derivative, in an in vitro mouse Sertoli cell model"Jpn. J. Pharmacol.. 89. 413-416 (2002)

Tabuchi, Y. 等人（3 位作者）：“在体外小鼠支持细胞模型中对双酚 A（一种烷基酚衍生物）响应的差异表达基因的 DNA 微阵列分析”Jpn。

Tabuchi, Y.et al.(9 authors): "Development and characterization of conditionally immortalized gastric epithelial cell lines from transgenic rats harboring temperature-sensitive simian virus 40 large T-antigen gene"Cell Struct. Funct.. 27. 71-79 (2002)

Tabuchi, Y. 等人（9 位作者）：“来自携带温度敏感猿病毒 40 大 T 抗原基因的转基因大鼠的条件永生化胃上皮细胞系的开发和表征”细胞结构。