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ヘパラネースによるヘパラン硫酸-タンパク質相互作用の調節に関する研究

乙酰肝素酶调控硫酸乙酰肝素-蛋白质相互作用的研究

基本信息

批准号：
15040208
负责人：
柳下正樹
金额：
$ 2.69万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

細胞膜型ヘパラン硫酸プロテオグライカンは細胞膜の基本的構成分子として広く動物細胞に分布している。ヘパラン硫酸糖鎖は成長因子、サイトカイン、細胞外マトリックス分子など多種類の生物学的活性物質と特異的な分子間相互作用を示すことにより、細胞に到達する種々の生物学的シグナルのモジュレーターとして機能している。このようなヘパラン硫酸プロテオグライカンの機能から考えて、この分子が細胞表面上のシグナル発生、伝達に関わる特定の限局したサブ構造に深く関連している可能性が考えられる。当研究室のこれまでの研究でも細胞膜結合様式の異なるヘパラン硫酸プロテオグライカン(シンデカンおよびグリピカン)が細胞表面上で異なる挙動を示すことが明らかにされ、それぞれの分子が限局した特定の膜構造と相互作用をしていることが示唆された。本年度の実験ではラット副甲状腺細胞の細胞培養系を用い、Triton X-100抽出に抵抗性を示す膜ドメイン分画をショ糖密度勾配超遠心法、free flow electrophoresis法を用いて調製し、ヘパラン硫酸プロテオグライカンを放射性代謝標識法およびコアタンパクに対するモノクロナル抗体を用いたWestern Blot法により検出し、またCD38、Giαなど種々の膜ドメイン特異的タンパクをWestern Blot法により検出し、これら分子の相互作用を解析した。その結果、一部のヘパラン硫酸プロテオグライカンが膜ドメインに局在し、ヘパラン硫酸糖鎖の存在が膜ドメイン構造を構成するタンパクの集合体形成に関与しているデータが得られた。来年度以降さらにヘパラン硫酸プロテオグライカンと膜ドメイン形成の関連、ヘパラン硫酸プロテオグライカンが膜ドメインの動態に与える影響に関して解析を続ける。

Cell membrane types are the basic molecular components of cell membranes and are distributed in animal cells. A wide variety of biologically active substances and specific molecular interactions are demonstrated in the presence of sulfate glycogen, growth factors, extracellular molecules, and biological functions of the cell. The function of this molecule is examined by the possibility of its molecular development on the surface of cells and the possibility of its molecular development on the surface of cells. When the laboratory studies cell membrane binding patterns, differences in molecular structure and interactions between specific membrane structures are demonstrated, differences in molecular structure and interactions on cell surfaces are demonstrated. This year's results include the use of cell culture systems for parathyroid cells, Triton X-100 extraction, membrane mapping, glucose density mapping, free flow electrophoresis, radio-metabolic labeling, Western Blot detection, CD38, CD38, CD39, CD39, CD3 Giα-species membrane specific protein analysis by Western Blot As a result, a part of the formation of aggregates is related to the existence of sulfate sugar chains and the formation of membrane structures In the coming year, the relationship between the formation of the sulfuric acid and the membrane, the dynamic relationship between the sulfuric acid and the membrane, and the influence of the sulfuric acid on the membrane will be analyzed.