FGF-1受容体に存在するヘパラン硫酸鎖のシグナル伝達における役割

FGF-1 受体中硫酸乙酰肝素链在信号转导中的作用

• 批准号: 10134208
• 负责人: 柳下 正樹
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10134208/
• 关键词: ヘパラン硫酸; プロテオグライカン; FGF; シグナル伝達; 副甲状腺; FGF受容体

これまでの研究でPTr細胞株の細胞増殖は細胞外液中カルシウム濃度に依存しており、おもにFGF-1のautocrine制御により調節されていることが明らかにされた。このFGF-1の作用機序において細胞表面ヘパラン硫酸プロテオグライカンの存在がFGF-1の高親和性レセプターへの結合に必須であることも示された。またこの細胞で発現されるFGFレセプター(FGFR)はレセプター自体がヘパラン硫酸鎖を持ちヘパラン硫酸プロテオグライカンとして存在していることが示されている。PTr細胞では、FGFRはそのmRNAのaltenative splicingにより3個あるいは2個の免疫グロブリン様ドメインを持つ分子種として細胞表面に発現しており、それぞれ3個所および1個所のヘパラン硫酸合成開始可能アミノ酸配列(Ser-Gly)を持っている。これら2種類のFGFRをコードするcDNAおよびsite directed mutagenesisにより上記Ser残基をAlaに変更するcDNAを調製し、エクスプレッションベクターとともにこれらcDNAを複数種の細胞に強制発現することにより、どのSer-Glyドメインがヘパラン硫酸合成開始のアクセプターとなりうるかを同定した。その結果2個の免疫グロブリン様ドメインを持つ短縮型FGFRだけがヘパラン硫酸合成開始のアクセプターとなりうることを示した。また、細胞外カルシウム濃度変化によりPTr細胞は短時間のうちにFGFRの細胞表面への発現、あるいは細胞内へのtranslocationを行うことによりFGF-1に対する細胞の感受性を変化させる機構を持つことも明らかになった。これら本年度の研究結果をまとめると以下のとおりである。副甲状腺細胞株PTrにおいてその細胞増殖はおもにFGF-1のautocrine制御により調節されており、(1)細胞表面ヘパラン硫酸はFGF-1のFGFRに対する高親和性結合に必須である、(2)細胞はFGFRをコードするmRNAのaltermative splicing、FGFRのゴルジ装置でのヘパラン硫酸化、細胞外カルシウム濃度感知機構を介したtranslocationよる細胞表面へのFGFRの発現調節などにより、ヘパラン硫酸とFRF-1の相互作用を制御している機構の存在することが明らかとなった。

In this study, cell proliferation of PTr cell lines was dependent on the concentration of FGF-1 in extracellular fluid. The mechanism of action of FGF-1 in the cell surface is the presence of a protein that is necessary for the binding of FGF-1 to a protein with high affinity. The FGF-derived protein (FGFR) produced by these cells has been shown to be self-contained and self-contained. PTr cells contain three or two altenative splicing sites for FGFR mRNA, two or three sites for immune response, and one or three sites for the initiation of sulfuric acid synthesis. The cDNA of two kinds of FGFR is modulated by site directed mutagenesis, Ser residue is added, and the cDNA of two kinds of FGFR is induced by stress in cells. The results showed that the two kinds of immune response factors were different from each other, and the shortened FGFR was different from each other. The expression of FGFR on the surface of PTr cells and the translocation of FGF-1 in PTr cells were detected in a short time, and the sensitivity of PTr cells to FGF-1 was changed. The results of this year's study are as follows: Cell proliferation in parathyroid cell line PTr is regulated by FGF-1 autocrine regulation,(1) cell surface sulfation is essential for high affinity binding to FGF-1 and FGFR,(2) alternative splicing of mRNA in cells to FGFR regulation, and sulfation of FGFR regulation. The presence of mechanisms that regulate the expression of FGFR on cell surface through the translocation of extracellular cell concentration sensing mechanisms and the interaction between FRF-1 and H2SO4

项目成果

柳下正樹: "最新骨粗鬆症-病態・診断・予防・治療" 折茂肇,須田立雄,井上哲郎,森井浩世(印刷中), (1999)

Masaki Yanagishita：“最新骨质疏松症 - 病理学、诊断、预防和治疗”Hajime Orimo、Tatsuo Suda、Tetsuro Inoue、Hiroyo Morii（出版中），（1999 年）

Yanagishita,M.: "Cellular Catabolism of heparan sulfate proteoglycans" TIGG. 10. 57-63 (1998)

Yanagishita,M.：“硫酸乙酰肝素蛋白聚糖的细胞分解代谢”TIGG。

柳下正樹: "細胞増殖を抑制するプロテオグライカン" 蛋白質,核酸,酵素. 43. 2589-2593 (1998)

Masaki Yanagishita：“抑制细胞增殖的蛋白多糖”蛋白质、核酸、酶。43. 2589-2593 (1998)

柳下正樹: "炎症過程における細胞外マトリックスの役割" 薬事日報. 8月28日号. (1998)

Masaki Yanagishita：“细胞外基质在炎症过程中的作用”Yakuji Nippo 8 月 28 日号（1998 年）。

Erlacher,L.: "Cartilage-derived morphogenetic proteins and osteogenic protein-1 differentially regulate osteogenesis" J.Bone Miner.Res.13. 383-392 (1998)

Erlacher,L.：“软骨衍生的形态发生蛋白和成骨蛋白 1 差异调节成骨”J.Bone Miner.Res.13。