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赤色感受性視物質アイオドプシンに結合するアニオン・水分子の物性と機能の解明

阐明与红色敏感视觉物质碘紫红质结合的阴离子和水分子的物理性质和功能

基本信息

批准号：
16041224
负责人：
七田芳則
金额：
$ 6.98万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

研究計画書に記載の実験計画に従い、以下の研究を行った。我々は、Lグループに属する視物質について、結合したCl^-が波長制御以外の分子特性にも影響を及ぼしているかを検討するため、培養細胞系で発現に成功したサル緑視物質を実験材料として研究を続けている。本年度はCl^-結合に関与する残基(His197)を他の19種のアミノ酸残基に置換し、それらの分子特性を比較検討することを試みた。19種のアミノ酸にそれぞれ置換した変異体の蛋白質部分をHEK293T培養細胞系で一過的に発現させたところ、そのうち13種の蛋白質が発色団と結合して色素蛋白質を生成した。次に、色素蛋白質を形成したそれぞれの変異体を実験材料として、その吸収極大、および、光照射により生成するメタI中間体の吸収極大と崩壊の時定数を測定した。その結果、変異体はそれらの分光学的な性質の違いによって3つのグループに分けられることがわかった。グループ1は野性型と同様の分光学的な性質を示し、吸収極大およびメタIの崩壊の時定数に対してCl^-結合の効果を示す。グループ2はCl^-結合の効果を示さない。グループ3はCl^-が結合していなくてもメタIの崩壊の寿命が非常に速くなった。野性型を含むグループ1の変異体ではCl^-の結合によってメタI中間体の寿命が変化する。したがって、メタIの状態でもCl^-は蛋白質部分に結合していることが明らかになった。またグループ3に分類される蛋白質は、191番目のヒスチジンをβ-構造を作る傾向にあるアミノ酸を置換したものである。これらの置換によりメタIの崩壊が非常に速くなることから、メタIの崩壊に伴ってCl^-結合サイト付近がβ-構造を取りやすい構造に変化することが推定された。

The research plan records the implementation plan, and the following research projects are carried out. We have successfully developed a cell line for the study of molecular properties other than wavelength control. This year, 19 additional amino acid residues (His197) were substituted and their molecular properties were compared. 19 kinds of proteins were found in HEK293T cell line, and 13 kinds of proteins were found in HEK293T cell line. Determination of absorption maxima and breakdown times of the secondary pigment protein formation As a result, the variation of the spectral properties of the three elements is caused by the violation of the spectral properties. The properties of the spectral spectrum of the wild type and the same type are shown, and the absorption maximum and the breakdown time of the Cl^-binding are shown. The effect of Cl^-binding on the two groups is shown. The life span of the product is very fast. The life of the intermediate is changed by the combination of Cl^-and Cl^-. The protein part of the protein is bound to the protein. The protein is classified into 191 amino acids and 192 amino acids. The structure of the structure is assumed to be composed of the following elements:

项目成果

期刊论文数量（34）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Direct observation of the complex formation of GDP-bound transducin with the rhodopsin intermediate having a visible absorption maximun in rod outer segment membranes.

直接观察 GDP 结合转导蛋白与视紫红质中间体的复合物形成，在杆外段膜中具有可见吸收最大值。

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Biochemistry. 44
影响因子：
0
作者：
Morizumi;T.
通讯作者：
T.

A rhodopsin exhibiting binding ability to agonist all-trans-retinal.

一种视紫红质，具有激动全反式视网膜的结合能力。

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Proc.Natl.Acad.Sci.USA 102
影响因子：
0
作者：
Tsukamoto;H.
通讯作者：
H.

Identification of a protanomalous chimpanzee by molecular genetic and electroretinogram analyses.

通过分子遗传和视网膜电图分析鉴定原始异常黑猩猩。

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Vision Research 45
影响因子：
0
作者：
Terao;K.;Mikami;A.;Saito;A.;Itoh;S.;Ogawa;H.;Takenaka;O.;Sakai;T.;A.;Teramoto;M.;Udono;T.;Emi;Y.;Kobayashi;H.;Imai;H.;Shichida;Y.;Koike;S.
通讯作者：
S.

A novel constitutively active mutation in the second cytoplasmic loop of metabotropic glutamate receptor

代谢型谷氨酸受体第二胞质环中的新型组成型活性突变

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
J.Neurochem. 91
影响因子：
0
作者：
Fukushima;Y.;Ikeuchi;M.et al.;Takahiro Yamashita
通讯作者：
Takahiro Yamashita

Expression and localization of an exogenous G protein-coupled receptor fused with the rhodopsin C-terminal sequence in the retinal rod cells of knockin mice.

与视紫红质 C 末端序列融合的外源 G 蛋白偶联受体在敲入小鼠视网膜杆细胞中的表达和定位。

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Experim.Eye Res. 80・6
影响因子：
0
作者：
T. Gonen;Y. Cheng;P. Sliz;Y. Hiroaki;Y. Fujiyoshi;S. C. Harrison and T. Walz;Mika Yamaguchi;Y. Kishimoto;I .Shimizu;Pabla Noblia;A.Suzuki;S.Kakunaga;Akira Katoh;Y.Toiyama;K .Nakamura;Yusuke Adachi;中島恭平;T.Kodama
通讯作者：
T.Kodama