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無脊椎動物に存在する脊椎動物類似視細胞の機能性蛋白質の分子進化

无脊椎动物类脊椎动物光感受器功能蛋白的分子进化

基本信息

批准号：
08257209
负责人：
七田芳則
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ホタテガイは、高等無脊椎動物に一般に存在する感桿型視細胞に加えて、形態的には脊椎動物の視細胞と類似する繊毛型視細胞を持っている。ホタテガイの繊毛型視細胞の光情報変換機構を分子進化の側面から議論する目的で、機能する光受容蛋白質(ロドプシン)とG蛋白質の同定を行った。2種類のロドプシンの全一次構造をPCR法を用いて決定した。一方(SCOP1)は、イカ・タコの視物質と一次構造が大変良くにていたが、もう一方のロドプシン(SCOP2)は、明らかになっている脊椎動物と無脊椎動物の視物質とそれぞれ30%程度の一致度しか認められなかった。抗体とRNAプローブを用いて組織化学的実験を行なったところ、SCOP1は感桿型視細胞に、SCOP2が繊毛型視細胞に存在していた。同様の方法で、眼に存在する5種類のGaサブクラスのcDNAを単離した。それらを用いて、バクテリアでペプチドを強制発現させ抗体を作成し、免疫組織化学的実験を行ったところ、Gqは感桿型視細胞の光受容部位に、Goが繊毛型視細胞の光受容部位に局在していた。すなわち、ホタテガイ繊毛型視細胞では、SCOP2とカップルする新しいGo共役型光情報交換機構が機能していることが明かとなった。最尤法を用いて視物質の分子系統樹を作成したところ、SCOP2は脊椎動物の感桿型視細胞に存在する視物質とも無脊椎動物の繊毛型視細胞に存在する視物質ともクラスターを形成せず、第三のサブグループを作ることが示唆された。さらに、視物質の分子系統関係は、視物質がカップルする情報伝達機構の違いも良く反映している。したがって、視物質の分子系統樹から、トランスドューシン共役型、Gq共役型そしてGo共役型の光情報変換機構が、脊椎動物と無脊椎動物の分岐前にすでに存在していたことが示唆された。

The higher invertebrates generally have rod-type visual cells, which are similar in morphology to those of vertebrates. The identity of photoreceptors and G proteins in the molecular evolution of the optical information conversion mechanism of hair cells The total primary structure of 2 kinds of protein was determined by PCR. One party (SCOP1) has a consistency of 30% between vertebrate and invertebrate visual matter and primary structure. The antibody RNA was used in histochemical studies to detect the presence of SCOP1 and SCOP2 in rod-type visual cells. In the same way, there are five kinds of cDNA fragments in the eye. In addition, the preparation of antibodies, immunohistochemical studies, and the development of light-receiving sites of rod-type optic cells were also carried out. SCOP2 is a new type of shared optical information exchange mechanism. In particular, the molecular phylogenetic tree of visual substances was constructed by using SCOP2 to indicate the presence of visual substances in vertebrate rod-type visual cells and the presence of visual substances in invertebrate trichomes. The molecular system relationship of visual substances is reflected in the information transmission mechanism. The molecular phylogenetic tree of visual substances shows that there is a common type of optical information conversion mechanism between vertebrates and invertebrates.