脂肪細胞分化を制御する自己分泌性液性因子の同定とそのシグナル伝達機構の解明

控制脂肪细胞分化的自分泌体液因子的鉴定及其信号转导机制的阐明

• 批准号: 16046214
• 负责人: 阪上 浩
• 金额: $ 5.12万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16046214/
• 关键词: プロテオミクス; プロテオーム解析; マイクロアレイ解析; アディポサイトカイン; 脂肪細胞; KLF15

1.培養脂肪細胞の培養上清における分泌蛋白のプロファイリング3T3-L1前駆脂肪細胞と分化誘導後の3T3-L1脂肪細胞の培養上清を2次元電気泳動像に供し、前駆脂肪細胞より優位に増加したスポットから質量分析にて同定した分泌蛋白は、アディポネクチンやMIF(macrophage migration inhibitory factor)などの既存のアディポサイトカインのみであった。しかし長期培養にて肥大化させた3T3-L1脂肪細胞や、インスリン、TNFαなどで処理した3T3-L1脂肪細胞の培養上清の分泌蛋白のプロファイリングを実施したところ、新規なサイトカインやガングリオシド結合タンパクなどを同定した。2.高脂肪食給餌マウスの脂肪組織における増殖因子遺伝子群発現の経時的追跡C57BL/6マウスに高脂肪食を給餌し、脂肪組織から経時的にRNAを回収、マイクロアレイ解析により、新規な増殖因子などを同定した。一部増殖因子に関しては、脂肪細胞の増殖・分化に関与することを証明した。3.転写因子KLF15の機能解析と制御シグナルの解明上記のような増殖因子のシグナルは、転写因子のリン酸化、核内移行などによって活性化を誘導し、その作用を発揮するものと考えられている。我々は脂肪細胞の分化に関与する転写因子群の一つとしてKLF15を同定したが、この転写因子KLF15は脂肪細胞のみならず、肝臓における糖新生系酵素の発現制御にも関与することを証明した。さらに、肥満に伴い脂肪組織のKLF15発現は著明に抑制されることを見出し、生体内でのKLF15の機能を検討するために、KLF15の遺伝子改変マウスを作製した。

1. The protein secretion in the culture supernatant of cultured adipocytes was determined by two-dimensional electrokinetic imaging of the culture supernatant of 3T3-L1 preadipocytes and induced 3T3-L1 adipocytes. In the long-term culture, hypertrophic 3T3-L1 adipocytes were treated with TNFα and protein secretion in the culture supernatant of 3T3-L1 adipocytes. 2. C57BL/6: RNA recovery, analysis and identification of new reproductive factors during high fat diet and subcutaneous fat diet A part of the proliferation factor is related to the proliferation and differentiation of adipocytes. 3. Functional analysis of KLF15 and its regulatory framework. We have demonstrated that KLF 15 is involved in the regulation of adipocyte differentiation, and that KLF 15 is involved in the regulation of adipocyte differentiation, liver development, and the production of glycogenic enzymes. The KLF 15 gene expression in the subcutaneous fat of the liver was inhibited by the presence of KLF 15 in the liver.

项目成果

A Kruppel-like factor KLF15 contributes fasting-induced transcriptional activation of mitochondrial acetyl-CoA synthetase gene AceCS2

• DOI: 10.1074/jbc.m312079200
• 发表时间: 2004-04-23
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Yamamoto, J;Ikeda, Y;Sakai, J
• 通讯作者: Sakai, J

Role of STAT-3 in regulation of hepatic gluconeogenic genes and carbohydrate metabolism in vivo

• DOI: 10.1038/nm980
• 发表时间: 2004-02-01
• 期刊: NATURE MEDICINE
• 影响因子: 82.9
• 作者: Inoue, H;Ogawa, W;Kasuga, M
• 通讯作者: Kasuga, M

Role of Kruppel-like factor 15 in PEPCK gene expression in the liver

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2004.12.096
• 发表时间: 2005-02-18
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Teshigawara, K;Ogawa, W;Kasuga, M
• 通讯作者: Kasuga, M

Deletion of Cdkn1b ameliorates hyperglycemia by maintaining compensatory hyperinsulinemia in diabetic mice

• DOI: 10.1038/nm1187
• 发表时间: 2005-01
• 期刊: Nature Medicine
• 影响因子: 82.9
• 作者: T. Uchida;Takehiro Nakamura;Naoko Hashimoto;Tomokazu Matsuda;K. Kotani;H. Sakaue;Y. Kido;Y. Hayashi;K. Nakayama;M. White;M. Kasuga

Role of Kruppel-like factor 15 (KLF15) in transcriptional regulation of adipogenesis

• DOI: 10.1074/jbc.m410515200
• 发表时间: 2005-04-01
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Mori, T;Sakaue, H;Kasuga, M
• 通讯作者: Kasuga, M