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神経内分泌ニューロン終末の動的制御機構

神经内分泌神经元末梢的动态控制机制

基本信息

批准号：
17021040
负责人：
檜山武史
金额：
$ 1.92万
依托单位：
National Institute for Basic Biology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

正中隆起にはタニサイト及びアストロサイト、下垂体後葉には下垂体細胞と呼ばれるグリア細胞が存在する。それぞれ、視床下部神経内分泌ニューロン由来の軸索末端を取り囲み、ホルモン分泌を制御するとされている。しかし、これらの細胞が、神経終末の動的機能制御を行なう機構は全く不明であった。研究代表者は、これまでに、正中隆起、下垂体後葉のグリア細胞に特異的に発現する分子Na_xが細胞外Na濃度の上昇に応じて細胞内Na濃度をダイナミックに変える能力を持つことを明らかにした。本研究では、Na_xが神経終末の動的機能制御に関与する可能性について検討した。2光子励起顕微鏡を用いて、急性脳スライスにおいて、血管壁細胞と神経内分泌ニューロンの終末、または血管壁細胞とグリア細胞突起終末を同時にイメージングし、タイムラプス観察により動的形態変化を観察する実験系を構築した。脳室に脂溶性色素を注入することにより、第3脳室底面に並ぶタニサイトを特異的に染色することができた。また、正中隆起に投射する弓状核のGABA作動性ニューロンに緑色蛍光蛋白質GFPを発現するマウスを用いて、神経内分泌ニューロンの神経終末を蛍光観察した。同様に血管内に別の波長の脂溶性色素を注入し、血管壁を染色した。2つの色素を同時に励起し、ダイクロイック・ミラーを介してそれぞれの蛍光を別々の光電子増倍管により捉え、同時観察した。マウスに強制遊泳等のストレスを与えた時の血中ACTH濃度や、脱水状態においた時の血中バソプレッシン量及びNa濃度、尿量を測定した。これらの実験において野生型とNa_x遺伝子ノックアウトマウスを比較した。

Median eminence にはタニサイト and びアストロサイト, posterior lobe には prolapse somatic と shout ばれるグリがア cells exist する. それぞれ, depending on the lower part of the bed god 経 endocrine ニューロン origin の axon terminal を take り囲み, ホルモン secretion を suppression するとされている. The mechanisms that control the functions of <s:1> cells が and the final movement of the divine economy を and なう are all く unknown であった. Research representatives は, これまでに, median eminence, the posterior lobe のグリア cells に specific に発 now する molecular Na_x が extracellular Na concentration rising のに応じて intracellular Na concentration をダイナミックに - える ability を hold つことを Ming らかにした. This study explores the functional control に relations and する possibilities of the final movement of the でで and Na_xが Shinto, as well as the にたて検て検て検て検 and て検 possibilities. Two photon excitation up 顕 micromirror を with いて, acute 脳スライスにおいて, vessel wall cells と god 経 endocrine ニューロンの terminal, または vessel wall cells とグリア cells swelled terminal を simultaneously にイメージングし, タイムラプス観 examine により dynamic morphological variations of を観 examine する be 験 department を build した. 脳 chamber に fat-soluble pigments を injection することにより, 脳 3 room and underside にぶタニサイトを specific に dyeing することができた. また, median eminence に projection する arcuate nucleus の GABA actuation sex ニューロンに蛍 green light protein GFP を発 now するマウスを with いて, god 経 endocrine ニューロンの god 経 terminal を蛍 light 観 examine した. In the same に blood vessels, に different wavelengths of liposoluble pigments を are injected into, and the blood vessel walls are を stained た. 2 つの pigment をに excitation し, at the same time ダイクロイック · ミラーを interface してそれぞれの蛍 light を don't 々の photoelectron raised times tube により catch え, at the same time 観 examine した. マウスに forced swimming のストレスを and えたのや ACTH concentration in the blood, the dehydrated においたの when blood バソプレッシン and び Na concentration determination, urine volume をした. これらの be 験において wild-type と Na_x posthumous son 伝ノックアウトマウスを compare した.