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網膜の予定神経節細胞の核に局在するノンコーディングRNAの機能解析

视网膜假定神经节细胞核内非编码RNA的功能分析

基本信息

批准号：
17026040
负责人：
中川真一
金额：
$ 3.2万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

我々は、中枢神経系の層構造の形成時に細胞タイプ特異的な振る舞いを制御する遺伝子を同定するために、それぞれの細胞タイプで特異的に発現している遺伝子を単一細胞サブトラクション法を用いて同定して来た。その過程で、通常のmRNAと異なり転写産物が核マトリクスに多数のスポットとして観察される、全長9kbのユニークなmRNA型ノンコーディングRNAを同定し、その特徴的な核内局在からこの遺伝子をGomafu(胡麻斑)と名付けた。本年度はGomafuの性質についてより詳細な解析を行なった。まず、GomafuをHelaやNeuro2Aなどの培養細胞に強制発現したところ、それらの細胞でも生体内と同様に核内に局在する事が分かった。また、これらの細胞を、Gomafuを発現していない親株と融合させてヘテロカリオンを作製したところ、Gomafu RNAはトランスフェクタント由来の核でのみ観察された事から、Gomafu RNAは転写後細胞質に輸送される事なく核内に保持されている事が分かった。また、これまでに知られているXist、Air、Evflなどの核内に局在するmRNA型ノンコーディングRNAと局在を比較したところ、GomafUはユニークな場所に局在する事が分かった。また、興味深い事に、Gomafu RNAは熱処理や翻訳阻害などのストレスによって消失する事が分かった。熱処理によっても新規タンパク質の合成が阻害される事から、Gomafuは半減期の短いタンパク質によって核内に保持されている可能性が示された。さらに詳しくGomafuの生理的機能を明らかにするために、Gomafuのノックアウトマウスを作製した。生後2ヶ月でメンデル比を調べたところ、野生型、ヘテロ個体、ホモ個体が1:2:1の割合で観察された事から、Gomafuは通常の発生には必要ない事が分かった。

When the layer structure of the central nervous system is formed, the cell-specific vibration is controlled by the same method. During the process, the usual mRNA and protein products were found in most of the DNA fragments, 9kb in length, 9kb in length, 9kb in length, 9 This year's Gomafu nature is detailed analysis. In vitro, Gomafu and Neuro2A were isolated from cultured cells under stress. Gomafu RNA is produced in the cytoplasm of the cell and remains in the nucleus. Xist, Air, Evfl, etc. are the core sites of mRNA type, RNA type, etc., and GomafU are the core sites of RNA type, etc. Gomafu RNA is heat treated, and the damage is prevented. The possibility of heat treatment to prevent the synthesis of new substances is shown in this paper. The physiological functions of Gomafu are described in detail below. 2 months after birth, Gomafu is usually born with a ratio of 1:2:1.