PIP2依存性ArfGAPタンパク質による形質膜制御機構の解明

阐明 PIP2 依赖性 ArfGAP 蛋白的质膜控制机制

• 批准号: 17048032
• 负责人: 廣瀬 まゆみ
• 金额: $ 4.03万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17048032/
• 关键词: AMAP1; Cortactin; SH3ドメイン; 癌転移; X線結晶構造解析; NMR; 創薬; Paxillin

本研究では、AMAP-1-Paxillin-Cortactinの複合体の三次元立体構造を解明することにより、リサイクリング機能と細胞膜および細胞骨格制御機能を明らかにし、さらにAMAP-1-Paxillin-Cortactinを標的とした癌細胞浸潤・転移抑制剤の開発のための基礎研究を行うことを目的とした。我々はすでに、乳癌転移を抑制する低分子化合物(UCS15A)を見いだしていた。UCS15A(Streptomyces sp.産生物質)はAMAP1とCortactinの相互作用を抑制することにより、乳癌細胞の形質膜伸展を抑制し、乳癌細胞の浸潤・転移を阻害する。また、我々は昨年度AMAP1のプロリンリッチ領域(KRPPPPPPG)とCortactin-SH3ドメインの複合体の構造を明らかにした。その構造は、AMAP1のプロリンリッチ領域を挟み込む形で二つのCortactin-SH3ドメインが結合した極めてユニークな複合体を形成していることが明らかにした。しかし、AMAP-1-Cortactin複合体とUCS15Aとの相互作用について、詳細な解析はなされていなかった。本年度は、女性の癌の羅漢率上位である乳癌の浸潤・転移抑制剤の開発の基礎研究を行うため、UCS15Aとプロリンリッチペプチドの相互作用について構造学的に明らかにすることを試みた。すなわち、UCS15Aおよび数種類のUCS15A類縁化合物(2b,2cなど)とプロリンリッチペプチドとの相互作用について、NMRおよび生化学実験により解析を行った。その結果、UCS15Aは極めて低濃度でAMAP1のプロリンリッチ領域およびプロリンのみから成るポリペプチドに直接結合することが分かった。さらに、UCS15Aのエポキシ基を含む6員環部位およびアルデヒド基がAMAP1のプロリンリッチ領域との相互作用に寄与している可能性が示唆された。

This study で は, AMAP - 1 - Paxillin - Cortactin の complex three dimensional の three-dimensional structure を interpret す る こ と に よ り, リ サ イ ク リ ン グ function と membrane お よ び cell skeletal system royal を Ming ら か に し, さ ら に AMAP - 1 - Paxillin - Cortactin を mark と し た carcinoma Cell infiltration · 転 migration inhibitor <e:1> development ため <e:1> basic research を conduct う <s:1> とを objective と た た I 々 は す で に, breast cancer planning move を inhibit す る low molecular compounds (UCS15A) を see い だ し て い た. UCS15A(a substance produced by Streptomyces sp.) <s:1> AMAP1とCortactin <s:1> interaction を inhibits する とによ とによ する breast cancer cell <s:1> plasmic membrane elongation を inhibits <s:1>, breast cancer cell <s:1> infiltration · 転 migration を hindrances する. ま た, I 々 は yesterday annual AMAP1 の プ ロ リ ン リ ッ チ areas (KRPPPPPPG) と Cortactin - SH3 ド メ イ ン の complex の tectonic を Ming ら か に し た. そ の tectonic は, AMAP1 の プ ロ リ ン リ ッ チ field を carry み 込 で む form two つ の Cortactin - SH3 ド メ イ ン が combining し た extremely め て ユ ニ ー ク な complex を form し て い る こ と が Ming ら か に し た. し か し, AMAP - 1 - Cortactin complex と UCS15A と の interaction に つ い て, detailed analytical は な な さ れ て い な か っ た. This year は の arhat, female の carcinoma upper で あ る の infiltration of breast cancer, planning to move inhibit tonic の open 発 の basic research line を う た め, UCS15A と プ ロ リ ン リ ッ チ ペ プ チ ド の interaction に つ い て tectonics に Ming ら か に す る こ と を try み た. す な わ ち, UCS15A お よ び several kinds の UCS15A class try compounds (2 b, 2 c な ど) と プ ロ リ ン リ ッ チ ペ プ チ ド と の interaction に つ い て, NMR お よ び biochemistry be 験 に よ り parsing line を っ た. そ の results, UCS15A は extremely め て low concentration で AMAP1 の プ ロ リ ン リ ッ チ field お よ び プ ロ リ ン の み か ら into る ポ リ ペ プ チ ド に directly combined す る こ と が points か っ た. さ ら に, UCS15A の エ ポ キ シ base を containing む 6 member ring parts お よ び ア ル デ ヒ ド base が AMAP1 の プ ロ リ ン リ ッ チ field と の interaction に send し て い が る possibility in stopping さ れ た.

项目成果

Crystallization and preliminary X-ray analysis of hyperthermophilic L-threonine dehydrogenase from the archaeon Pyrococcus furiosus

古菌激烈火球菌超嗜热 L-苏氨酸脱氢酶的结晶和初步 X 射线分析

• 发表时间: 2005
• 期刊: Acta Crystallographica sect. F 61
• 作者: M.Itoh;K.Nagatomo;Y.Kubo;Y.Sugimoto;O.Saitoh;M.Watanabe;Kaori Kurashima-Ito;Yasuhiro Isogai;Sundaresan Rajesh;伊藤 隆(共著);伊藤 隆(共著);Noriko Higashi
• 通讯作者: Noriko Higashi

Crystallization and preliminary X-ray analysis of rat SHPS-1

大鼠 SHPS-1 的结晶和初步 X 射线分析

• 发表时间: 2006
• 期刊: Crystallograph Sect F Struct Biol Cryst Commun. 1;62(Pt 3)
• 作者: Azuma H;Ehata S;Miyazaki H;Watabe T;Miyazono K. et al.;Nagata A
• 通讯作者: Nagata A

Crystal structure of lipoate-protein ligase a from Escherichia coli -: Determination of the lipoic acid-binding site

• DOI: 10.1074/jbc.m505010200
• 发表时间: 2005-09-30
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Fujiwara, K;Toma, S;Taniguchi, H
• 通讯作者: Taniguchi, H

Preliminary crystallographic analysis of the antibiotic discharge outer membrane lipoprotein OprM of Pseudomonas aeruginosa with an exceptionally long unit cell and complex lattice structure

超长晶胞和复杂晶格结构的铜绿假单胞菌抗生素排出外膜脂蛋白OprM的初步晶体学分析

• 发表时间: 2005
• 期刊: Acta Cryst. F61
• 作者: Akama;H.
• 通讯作者: H.

Ab initio crystal structure determination of spherical viruses that exhibit a centrosymmetric location in the unit cell

从头算晶体结构测定在晶胞中表现出中心对称位置的球形病毒

• 发表时间: 2005
• 期刊: Acta Crystallographica sect. D 61
• 作者: 齊藤修;増保生郎;T.Watanabe;Y.Miyake;Mayumi Hirose;A.Wada;Y.Yamaguchi;Aki Nagata;Y.Nishimura;T.Shimizu;Shigeru Hashimoto;S.Komiya;Tomoyo Takai;C.Kimura-Yoshida;Miho Kihara;Kenji Inaba;Aki Nagata;Junichiro Taka
• 通讯作者: Junichiro Taka