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雄しべの分化に伴うプラスチドの分化機構の研究

与雄蕊分化相关的质体分化机制研究

基本信息

批准号：
17051013
负责人：
石黒澄衞
金额：
$ 3.84万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

1.タペートソーム・エライオプラストの可視化と発達過程の追跡生きている細胞内でのタペートソームやエライオプラストの発達及び分解の過程を詳細に観察するため、タペートソームに蓄積するGRP17-GFPとエライオプラストに蓄積するFBP1-GFPをそれぞれタペート細胞で発現するシロイヌナズナ植物体を作製した。GRP17-GFPの蛍光はステージ10/11から小さな顆粒状に見え始め、ステージ12前期では大きな顆粒となってタペート細胞内に分布した。これらの顆粒の形や大きさはタペートソームとよく一致することから、タペートソームの形成過程を追跡できていると結論した。タペート細胞の崩壊に伴ってGRP17-GFPの蛍光は葯室中に広がり、やがて花粉表面に沈着した。一方FBP1-GFPはステージ9から見え始め、ステージ12前期までは顆粒状に観察できるが、タペート細胞の崩壊とともに急速に消失した。これも電子顕微鏡観察による観察結果とよく一致した。これらの植物体は、今後、可視化されたオルガネラの単離・生化学的解析や、両オルガネラの発達過程に異常を示す突然変異体のスクリーニング等に用いる。2.ポレンコートの主要タンパク質EXLの機能解析EXL4とEXL6の機能を明らかにするため、T-DNA挿入による遺伝子破壊とRNAiにより両遺伝子の発現を同時に抑制したシロイヌナズナを作製した。この植物体はポレンコートの形成に異常を示し、花粉稔性が低下していた。電子顕微鏡観察の結果、タペート細胞が崩壊する際のオルガネラの分解が正常に進行しないことがわかった。EXL4、EXL6はタペート細胞特異的に発現することが確認できた。3.ジャスモン酸生合成経路で働くリパーゼの解析DAD1を葉で過剰発現させると葉緑体のチラコイド膜が崩壊することが電子顕微鏡観察から明らかになった。DAD1の基質はチラコイド膜のガラクトリピドであると推定される。また、DAD1のホモログは、共同してジャスモン酸生合成経路で働いていることが明らかになった。

1. To trace the visual development and decomposition process of the selection tool and the selection tool in the cell, we will observe in detail the development and decomposition process of the selection tool and the selection tool in the cell, and prepare a special plant body in which GRP17-GFP accumulated in the selection tool and FBP1-GFP accumulated in the selection tool are revealed in the selection tool. GRP17-GFP is distributed in cells with small granules at the beginning and large granules at the beginning of the 12-day period. The shape of the particles is different from the shape of the particles. GRP-17-GFP is the most important protein in the pollen cell. FBP1-GFP is the first to be detected, and the second to be detected. The results of the electron microscope were consistent. This plant body is used in the following fields: analysis of biological characteristics, display of abnormalities in the development process of biological characteristics, visualization of biological characteristics, etc. 2. Functional analysis of EXL4 and EXL6, which are the main components of DNA insertion, gene expression and RNAi inhibition. The plant body is abnormal in the formation of pollen, and the pollen fertility is low. The results of electron microscope examination showed that the decomposition of the cells was normal when they collapsed. EXL4 and EXL6 are cell specific. 3. The analytical DAD1 of the radioactive substance in the acid production pathway of the membrane was overtly discovered and the chloroplast membrane collapsed, which was clearly visible when viewed with an electronic microscope. The substrate of DAD1 is determined by the temperature of the film. DAD1 is a common source of acid.