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薬物排出の最終段階を担う新規有機カチオン輸送体の構造と機能及び相互作用

负责药物流出最后阶段的新型有机阳离子转运蛋白的结构、功能和相互作用

基本信息

批准号：
18059023
负责人：
大塚正人
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18059023/
关键词：
Multidrug transporter organic cation transporter kidney MATE Multidrug Organic cation transport

项目摘要

申請者は現在までにMATEのプロトタイプのVibrio Parahaemolyticus由来のNorMに関して機能性アミノ酸残基を同定している(J Bacteriol,2005)。NorMの薬物輸送に関与する機能性アミノ酸残基は、膜貫通領域に存在している酸性アミノ酸残基であった。バクテリア由来のMATEトランスポーターのNorMは、ヒトMATE1とタンパク質レベルで23.6%の相同性しかないが、これらの酸性アミノ酸残基のうちの2つはヒト及びマウスのMATE1及びMATE2で保存されていた。以上のことから、哺乳類のMATEにおいてもこれらの酸性アミノ酸残基を含む極性アミノ酸残基が、MATEの基質認識機構や、プロトンとの交換輸送機構に直接関係していることが予想される。これらの予想を基にMATE1の点変異体を複数作製した。(MATEの極性残基部分:E278A,E319A,H386A,E389A 等)。そして、TEA(テトラエチルアンモニウム)の取り込み活性に与える影響をRIトレーサー実験により調べた。この結果より機能性アミノ酸残基を決定した。また、MATE1変異体の基質特異性や、輸送活性に及ぼすpHの影響に対する変化についても詳細に解析を行うことによって、OC/H+交換輸送における基質認識機構や、プロトンとの交換輸送機構を解明した。ヒトMATE1の膜貫通領域にある極性アミノ酸のうち、E273Qの点変異体を作成しHEK293細胞に発現させたところ、TEAの輸送活性は完全に消失した(PNAS 2005,)。また、MATE1の機能と構造を理解する上でその分子単体に注目し、大量発現・精製及びそのリポソームへの再構成系を確立した。大量発現系は、昆虫細胞を用いた発現系を用いた。また、大量発現したタンパク質を精製・リポソームに再構成し、活性の測定を行う系を構築した。こうした技術をMATEタンパク質の機能解析に応用した。そして輸送測定で基質とH^+の化学平衡か測定した。

The applicant said that the source of the Vibrio Parahaemolyticus is the origin of the MATE. The functional amino acid residue is the same as the J Bacteriol,2005. There are acid residues and acid residues in the fields of NorM and membranes. The cause of the disease is MATE, MATE1, NorM, MATE1, homology, homology, acid, acid, acid residue, MATE1 and MATE2. The acid residues of the above MATE and mammalian mammals contain lethargic acid residues, MATE-based information institutions, and transportation institutions directly. If you want to use the base MATE1 point, you will want to use the complex number as an example. (part of MATE sexual residues: E278A, E319A, H386A, E389A, etc.) Please read, TEA (please tell me how to do something about activity) and "RI" and "live". The results showed that the functional acid residues determined the molecular weight. On the basis of the information, the MATE1 system, the basic information, the activity and the performance of the system, the system, the pH system, the computer, the information and the information system. The MATE1 membrane is sensitive to acid, E273Q and E273Q to form the HEK293 cell to show the activity to disappear completely (PNAS 2005,). The system and MATE1 can be used to understand how much attention has been paid to the molecules, a large number of them have been found, and the system has been formed again. A large number of existing systems and insect cells are used. In general, a large number of real-time data show that there are significant differences in the composition and determination of the system. In order to improve the quality of technology, MATE technology, and the ability to analyze and use the equipment. The chemical equilibrium measurement is based on the basic H ^ + chemical equilibrium measurement.

项目成果

期刊论文数量（6）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

A novel variant of mouse MATE-1 H+/organic cation antiporter with a long hydrophobic tail

具有长疏水尾的小鼠 MATE-1 H /有机阳离子逆向转运蛋白的新变体

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
Arch. Biochem. Biophys. 469
影响因子：
0
作者：
Kobara;A.;Hiasa;N.;Matsumoto;T.;Otsuka;M.;Omote;H.;and Moriyama;Y.
通讯作者：
Y.

Transmembrane topology of vesicular glutamate transporter 2

DOI：
10.1248/bpb.29.547
发表时间：
2006-03-01
期刊：
BIOLOGICAL & PHARMACEUTICAL BULLETIN
影响因子：
2
作者：
Jung, SK;Morimoto, R;Omote, H
通讯作者：
Omote, H

Identification of a vesicular nucleotide transporter

DOI：
10.1073/pnas.0800141105
发表时间：
2008-04-15
期刊：
PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA
影响因子：
11.1
作者：
Sawada, Keisuke;Echigo, Noriko;Moriyama, Yoshinori
通讯作者：
Moriyama, Yoshinori

Role of glutamate residues in substrate recognition by human MATEl polyspecilic H+/organic cation exporter.

谷氨酸残基在人MATEl多特异性H/有机阳离子输出体识别底物中的作用。