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緑葉液胞のMATE型トランスポータのアルカロイド輸送能とシンク機能分化

绿叶液泡中MATE型转运蛋白的生物碱转运能力和库功能分化

基本信息

批准号：
19039019
负责人：
矢崎一史
金额：
$ 2.69万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

植物の生産するアルカロイドは、強い細胞毒性を有し、補食生物や病原微生物から植物を守っているとされる。アルカロイドは液胞内に隔離されることが多いが、これによりアルカロイドを安全に生産・蓄積しながら傷害ストレス時にはその機能が果たせる。タバコのアルカロイドであるニコチンは、傷害応答等に応答し根で生産誘導され、葉に転流されて高蓄積する。申請者は、タバコ培養細胞BY2のニコチン生産がジャスモン酸で誘導されることを利用し、ニコチントランスポータの候補遺伝子としてMATEのcDNA3種を得た。本研究ではMATE蛋白について、その液胞局在とニコチン輸送機能を生化学的に解明し、根からのアルカロイド転流の分子機構の解明と、アンローディング時の物質移動の実態を突き止め、障害・感染応答に寄与する液胞機能について明らかにすることを目的とした。Nt-T401(NtJAT-1と命名)については、特異的ペプチド抗体を用いて緑葉の液胞に局在すること、また酵母において発現させ明確なニコチン輸送活性を示すことを証明した。また、プロテオリポソーム再構成系を用いて、プロトン/ニコチン対向輸送体であることを示した。Nt-C215は通常の育成条件下ではほとんど発現が見られないのに対し、ジャスモン酸投与で特異的、かつ飛躍的に発現が上昇することが判明した。またその発現組織は葉に特異的であり、他の組織では全く検出されなかった。なお、この遺伝子に関しては、パラログが存在しており、アミノ酸配列がわずかに異なるものが約3:1の割合で発現していた。Nt-T449に関しては、ジャスモン酸に応答して茎での発現のみが上昇することが判明した。それぞれの発現パターンは特有であり、高次機能としては別々の役割を果たしていることが示唆された。

Plant production is very difficult, and it has strong cytotoxicity, and it can feed on organisms and pathogenic microorganisms. The function of isolation in the cell is to produce, accumulate and protect the environment. The root production induction system and leaf flow system are highly accumulated. The applicant obtained three kinds of cDNA from BY2 cells cultured in vitro, namely, cDNA from BY2 cells cultured in vitro, cDNA from BY2 cells cultured in vitro. The aim of this study is to elucidate the biochemical function of MATE protein in cell transport, the molecular mechanism of cell flow, the state of substance movement during cell transport, and the mechanism of cell function in cell transport. Nt-T401(named NtJAT-1) was identified as a specific anti-tumor antibody that could be used in green leaf cells and yeast cells to demonstrate its specific anti-tumor activity. The structure of the transport system is shown in the figure below. Nt-C215 is not found under normal breeding conditions, but it is found that acid injection is unique and leap occurs. The organization is unique, and the organization is complete. A 3:1 split appears between the two groups. Nt-T449 is the first time that the acid has been detected. It's a special feature of the game.