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タウのコンフォメーション変化のタウオパチーにおける意義と抑制法開発

tau蛋白构象变化在tau蛋白病中的意义及抑制方法的开发

基本信息

批准号：
20023002
负责人：
森島真帆
金额：
$ 4.86万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

タウオパチー発症機構におけるタウのコンフォメーション変化の意義について、PFC法を利用して検証した。ダイマー形成あるいはペーパークリップ構造検出用のGFP断片-タウ融合タンパク質を、COS-7およびHEK293細胞に発現させると、GFPの再会合による蛍光シグナルが検出され、発現したタウが細胞内で目的とするコンフォメーションを取ることが確認できたので、次にin vivoにおいてタウのコンフォメーション変化が神経細胞に及ぼす影響を解析した。同様のGFP断片融合タウをunc-119プロモーター制御下で線虫の神経細胞に特異的に発現させた。作成したトランスジェニック(Tg)線虫では、神経軸索と細胞体でGFPの再会合蛍光シグナルが観察され、in vivo神経細胞内においても分子間あるいは分子内相互作用によるタウのコンフォメーションの変化が起こることが分かった。また、ウェスタンブロット解析により、線虫に発現したヒトタウは多くの部位でリン酸化を受けていることが分かった。次に、神経機能への影響を調べるためにTg線虫の行動解析を行った。その結果、株により程度の差があるものの、Tg線虫では若い時期において既に、行動範囲の限局性、正弦波運動の波形異常、溶液中での屈曲運動能の低下などの運動機能障害を呈する傾向が認められた。これらの運動機能は、加齢に伴い更に低下が見られた。また興味深いことに、長期間飼育によりTg線虫の一部で、神経軸索においてドット状のGFP蛍光シグナルが観察された。線虫の神経細胞は加齢による形態変化が少ないことが知られていることから、これは神経変性像を現しているのではないかと考えられる。現在、これらの表現型をさらに詳細に調べるとともに、それを軽減するような薬剤および遺伝的因子の探索を行っている。

The clinical organization is responsible for the diagnosis and treatment of the disease. The meaning of the word "information" and the use of the PFC method. The GFP fragments were fused, the COS-7 fragments were fused, the HEK293 cells were reunited, the GFP fragments were reunited, the light was detected, the intracellular targets were detected, the intracellular targets were detected, and the data were obtained. The next time you in vivo, you know, you know In the same way, the GFP fragments are fused with the unc-119 fragments to control the worms, the worms, and the cells. The cell bodies of Tg, GFP, and in vivo were made, and then they were reunited. The interaction between molecules in the cells and the interaction between molecules in the cells were detected. This is the first step in the analysis of the disease, and the worms show that the parts are acidified and separated. In the second place, the machine will be able to analyze the behavior of Tg worms. The results of the test, the difference of the strain temperature, the time limit of the Tg worm test, the limitation of the action range, the sinusoidal wave shape, the low kinetic energy barrier of the strain in solution and the motor energy barrier of the low strain in the solution showed a negative response. It is necessary to pay more attention to the ability of the mobile phone, and to increase the number of vehicles. There is a deep taste of the food, and there is a long-term development of the Tg bug, and the god needs to pay a lot of attention to the GFP light emission monitoring system. The worms, the gods, the worms, the worms, the Now, in the form of a table, you can find out the factors that affect your behavior.