誘電泳動を利用する細胞の表現型別識別と分離

使用介电泳进行细胞表型鉴定和分离

• 批准号: 20034050
• 负责人: 安川 智之
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: University of Hyogo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20034050/
• 关键词: 誘電泳動; 電気回転; 細胞; 細胞分離; 交流電圧; マイクロ電極; 免疫アッセイ

本研究の目的は,「誘電泳動を利用する細胞操作技術の電気回転現象への応用」により細胞を大量・一括・迅速に制御・回転させ細胞膜表面の受容体の発現量と表現型(フェノタイプ)を解析する手法を確立し,さらに,解析・識別した細胞を分離,捕捉および回収できる簡便なシステムの構築にある.抗CD33抗体を固定化した交互くし型マイクロアレイ電極と平板ガラス基板を厚さ30μmのスペーサを介して挟み込みマイクロ流路構造を有する誘電泳動デバイスを作製した.この流路内に膜表面にCD33抗原が発現している白血球株であるHL-60細胞の懸濁液を導入し,正の誘電泳動により細胞を抗体固定化電極上に配列させた.交流電圧の周波数を変化させ負の誘電泳動を作用させたところ,一部の細胞は電極アレイから電極-電極間に移動したが,ほとんどの細胞がアレイ電極上に捕捉され配列状態を維持した.しかし,CD33抗原を発現していない白血球細胞株であるCCRF-CEM細胞を用いて電極上に配列させたところ,ほとんどの細胞が捕捉されず電極-電極間に移動した.また,電極表面上に固定化する抗体をCD33に特異性を持たない抗マウスIgG抗体を固定化した場合には,HL-60およびCCRF-CEM細胞ともに捕捉されなかった.これは,細胞膜表面上のCD33と電極上に固定化した抗体間で免疫反応が進行したためである.誘電泳動による細胞の配列は約10秒程度で可能であり,トータル3分程度で膜タンパク質を発現している白血球細胞を識別できる.システムを確立するために,細胞の濃度,溶媒の導電率,交流電圧および周波数についても詳細な最滴化を行った.

は の purpose, this study "electrophoresis dynamic を lure す る cell operation 気 の electricity back to the phenomenon of planning へ の 応 with" に よ cells り を, an enclosed, に system royal, quickly back to planning さ せ の membrane surface by the capacity of body の 発 now quantity と phenotypes (フ ェ ノ タ イ プ) を parsing す る を established し, さ ら に, parsing, identify し を た cell separation, capture お よ び back 収 で Youdaoplaceholder0 る makes it easy to construct にある with なシステム. Anti を CD33 antibody immobilized し た interaction く し type マ イ ク ロ ア レ イ electrode と tablet ガ ラ ス 30 microns thick substrate を さ の ス ペ ー サ を interface し て carry み 込 み マ イ ク ロ flow structure を have す る electrophoresis lure move デ バ イ ス を cropping し た. こ の flow within に membrane surface に CD33 antigen が 発 now し て い る white blood cell strains で あ る の suspension - HL 60 cells The turbid liquid を was introduced into the を, and the によ inhibitor を antibody immobilization electrode was に and arranged させた by forward coil-induced electrophoresis. Alternating current (ac) 圧 の cycle for を variations change さ せ negative role の electrophoresis lure move を さ せ た と こ ろ, a の cells は electrode ア レ イ か ら between electrode and electrode に mobile し た が, ほ と ん ど の cells が ア レ イ electrode に capture さ れ match column state を maintain し た. し か し, CD33 antigen を 発 now し て い な い leukocyte cell lines で あ る CCRF - CEM is fine Cell を with い て electrode に match column さ せ た と こ ろ, ほ と ん ど が の cells capture さ れ ず between electrode and electrode に mobile し た. ま た, electrode surface に immobilized す る antibody を CD33 に specificity を hold た な い resistance マ ウ を ス IgG antibody immobilized し た occasions に は, HL - 60 お よ び CCRF - CEM cells と も に capture さ れ な か Youdaoplaceholder0. Youdaoplaceholder6 れ れ たためである, on the cell membrane surface, <s:1> CD33と electrode に immobilized <s:1> た antibodies, で immunorepulsion 応が is carried out for たためである. Electrophoresis lure move に よ の る cells with column は degree of about 10 seconds で may で あ り, ト ー タ ル 3 degree で membrane タ ン パ ク qualitative を 発 now し て い る leukocyte cell を recognition で き る. シ ス テ ム を establish す る た め に, cell の concentration, solvent の conductivity, alternating current (ac) 圧 お よ び cycle for に つ い て も detailed な most drops を line っ た.

项目成果

Negative dielectrophoretic manipulation with microparticles for rapid inununosensing

使用微粒进行负介电泳操作以实现快速无声传感

• 发表时间: 2008
• 作者: T. Yasukawa;et.al.
• 通讯作者: et.al.

基礎から材料への展開 第3節 第15章 超分子電

从基础到材料的发展第三节第十五章超分子电

• 发表时间: 2009
• 作者: 安川智之;水谷文雄
• 通讯作者: 水谷文雄

Enzyme Immunoassay for Insulin Using Highly-Sensitive Hydrogen Peroxide Sensors Based on Charge Accumulation Systems

使用基于电荷累积系统的高灵敏度过氧化氢传感器对胰岛素进行酶免疫分析

• 发表时间: 2008
• 作者: T. Yasukawa;et.al.
• 通讯作者: et.al.

Rapid Fabrication of Nanoparticles Array on Polycarbonate Membrane Based on Positive Dielectronhoresis

基于正介电电泳的聚碳酸酯膜上纳米粒子阵列的快速制备

• 发表时间: 2008
• 期刊: Sensors and Actuators B : Chemical 131
• 作者: Hyun Jung Lee;et.al.
• 通讯作者: et.al.

誘電泳動を用いた高感度迅速ELISAシステム

使用介电泳的高灵敏度和快速 ELISA 系统

• 发表时间: 2009
• 作者: 安川智之;ら
• 通讯作者: ら