グルタミン酸輸送体の機能・局在調節と異種シナプス間拡散性クロストークの生理的連関

谷氨酸转运蛋白的功能和局部调节与不同突触之间的扩散串扰之间的生理关系

• 批准号: 20056032
• 负责人: 佐竹 伸一郎
• 金额: $ 3.26万
• 依托单位: National Institute for Physiological Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20056032/
• 关键词: 介在ニューロン; 顆粒細胞; 興奮性シナプス後電流; ペアパルス増強; 減衰時定数; 拡散; スライスパッチクランプ法; グルタミン酸輸送体; プルキンエ細胞; バーグマングリア; 登上線維; 長期増強

フィードフォワード抑制回路(顆粒細胞-分子層介在ニューロン-プルキンエ細胞)を介した小脳情報処理プロセスにおいて、異種シナプス間拡散性クロストークが担う生理的役割を明らかにするため、顆粒細胞-介在ニューロン間興奮性シナプス伝達の特性を調べている。その過程で、顆粒細胞(上向性線維)の2回連続刺激に伴い、介在ニューロンから記録される興奮性シナプス後電流(EPSC)の2回目EPSCの振幅値と減衰時定数が、一過性に増大する現象を見出した(ペアパルス増強)。予備的に実施した薬理学実験の結果から、(1)振幅増大はシナプス小胞の放出確率と放出多重性の増大、(2)減衰時間増大は放出多重性増大に伴いシナプス外領域に拡散した伝達物質グルタミン酸の蓄積により引き起こされたと推定している。しかし、EPSCの振幅や減衰時間が、神経伝達物質の放出多重性・拡散性の変化を介したシナプス前性機構によって制御されるという現象はこれまで報告がなく、その分子基盤や生理的な意義は全く不明である。こうした背景に基づき、神経活動に依存してEPSCキネティクスが変化するメカニズムを追究すると共に、EPSC減衰時間の制御にグルタミン酸輸送体が関わる可能性について検討を行った。はじめに、EPSCキネティクスを初期相、ピーク相、減衰相に分けて詳しく解析した。2回目EPSC(刺激間隔:30ミリ秒)では、刺激からEPSC開始までの反応潜時が1回自EPSCよりも顕著に短縮していた。一方、EPSC開始点からピークまでの到達時間は延長していた。さらに、二重指数関数を適用して、EPSC減衰相を急速減衰成分(τ_<fast>)と緩徐減衰成分(τ_<slow>)に分けて解析し、減衰時間のペアパルス増強はτ_<slow>の構成比率(%_<slow>)の増大によって惹起されていることを明らかにした。また、グルタミン酸輸送体阻害薬TBOAは、τ_<slow>と%_<slow>を共に増大させて、減衰時間のペアパルス増強を昂進した。一方、AMPA受容体の低親和性競合阻害薬γ-DGGは、%_<slow>を減少させて減衰時間のペアパルス増強を減弱した。こうした観察結果から、連続刺激による多重性放出促進に伴い顆粒細胞終末から大量に放出されたグルタミン酸は、輸送体タンパク質による回収を逃れて近傍のシナプスやペリシナプス領域に存在するAMPA受容体に低濃度で作用することにより、EPSC減衰時間の増大を引き起こしたと結論した。

フ ィ ー ド フ ォ ワ ー ド inhibitory circuits (granulosa cells - molecular layer interface in ニ ュ ー ロ ン - プ ル キ ン エ cells) を interface し た small 脳 intelligence 処 Richard プ ロ セ ス に お い て, heterogeneous シ ナ プ ス company between divergence ク ロ ス ト ー ク が bear う physical battle cut を Ming ら か に す る た め, granular cell - medium in ニ ュ ー ロ ン between excitatory シ ナ プ ス 伝 da の features を adjustable べ て Youdaoplaceholder0 る. で そ の process, granular cell tropism line on (d) の 2 back even 続 stimulus に い, interface in ニ ュ ー ロ ン か ら record さ れ る excitatory シ ナ プ ス after current (EPSC) の 2 pa2 EPSC amplitude numerical と の damping when the destiny が, transient に raised a big す を る phenomenon shows し た (ペ ア パ ル ス rights). To prepare に be applied し た 薬 neo-confucianism be 験 の results か ら, large amplitude (1) raised は シ ナ プ ス vesicular の release of probabilistic と release multiplicity の rights, (2) damping time raised は release multiplicity raised big に partner い シ ナ プ ス outside areas に company, scattered し た 伝 of material グ ル タ ミ の ン acid accumulation に よ り lead き up こ さ れ た と presumption し て い る. し か し, EPSC amplitude や の が damping time, god 経 伝, multiplicity of substances released の company, divergence の variations change を interface し た シ ナ プ ス before sex institutions に よ っ て suppression さ れ る と い う phenomenon は こ れ ま で report が な く, そ の molecular base plate や physiological significance な は く all unknown で あ る. こ う し た background に base づ き, god 経 に dependent し て EPSC キ ネ テ ィ ク ス が variations change す る メ カ ニ ズ ム す を investigated る と に, EPSC damping time の suppression に グ ル タ ミ ン acid conveying body が masato わ る possibility に つ い て 検 line for を っ た. Youdaoplaceholder0 じめに, EPSCキネティ スを スを スを initial phase, ピ じめに <e:1> phase, decrement phase に detailed けて く analysis た た. 2 EPSC pa2 (stimulus intervals: 30 ミ リ seconds) で は, stimulating か ら EPSC began ま で の anti 応 snorkeling が 1 from the EPSC よ り も 顕 the shortening of the に し て い た. One party, the EPSC starting point らピ らピ まで まで まで <s:1> the arrival time of まで is extended by <s:1> て た た. さ ら に, double index number of masato を applicable し て, EPSC minus signs を rapid damping component (tau _ < fast >) と slow xu damping component (tau _ < missile >) に points け て parsing し, damping time の ペ ア パ ル ス raised strong は tau _ < missile > の composition ratio (% _ < missile >) の raised large に よ っ て provoked さ れ て い る こ と を ら Youdaoplaceholder0 に た. ま た, グ ル タ ミ ン acid conveying body resistance against 薬 TBOA は, tau _ < missile > と % _ < missile > を に raised large total さ せ て, damping time の ペ ア パ ル ス raised strong を aung into し た. One party, AMPA の low affinity competition let body resistance against 薬 gamma DGG は, % _ < missile > を reduce さ せ て damping time の ペ ア パ ル ス raised strong を decrease し た. こ う し た 観 examine results か ら, even 続 stimulation に よ る multiplicity released to promote に with い granular cell terminal か ら released a large number of に さ れ た グ ル タ ミ ン acid は, conveying タ ン パ ク qualitative に よ る back 収 を fled れ て nearly alongside の シ ナ プ ス や ペ リ シ ナ プ に ス field exist す る AMPA subjected to let body に low concentration で す る こ と に よ り, EPSC damping time Youdaoplaceholder0 increase を lead to た たと たと conclusion た た.

项目成果

Multiple and Ca_v2 channel subtype-dependent forms of paired-pulse facilitation at cerebellar granule cell-interneuron synapses

小脑颗粒细胞-中间神经元突触的多种和 Ca_v2 通道亚型依赖性成对脉冲促进形式

• 发表时间: 2009
• 作者: Satake S;Inoue T;Imoto K
• 通讯作者: Imoto K

ラット小脳顆粒細胞のシナプス小胞放出におけるカルシウムチャネルサブタイプ依存性

大鼠小脑颗粒细胞突触小泡释放的钙通道亚型依赖性

• 发表时间: 2008
• 作者: 佐竹伸一郎;井本敬二
• 通讯作者: 井本敬二

シナプス小胞放出過程(確率・多重性・時機)のカルシウムチャネルサブタイプ別制御

钙通道亚型对突触小泡释放过程（概率、多重性、时间）的调节

• 发表时间: 2008
• 作者: 佐竹伸一郎;井本敬二
• 通讯作者: 井本敬二

G_<i/o>共役型受容体が仲介するシナプス前抑制における多様性

G_<i/o>-偶联受体介导的突触前抑制的多样性

• 发表时间: 2009
• 作者: 佐竹伸一郎;井本敬二
• 通讯作者: 井本敬二