形質転換植物の分化に伴う外来遺伝子の発現解析

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本研究はDNA導入法を用いた植物の分化に伴う遺伝子の発現解析を目的としたものである. そのため以下の方法が用いられた.すなわち, すでに作成されたタバコの形質転換体を用い, 外来遺伝子の発現と組織分化との関係を調べた. さらにRiプラスミドによるタバコα形質転換体を用い, 分子レベルで解析を行った.本研究質ですでに作成された形質転換タバコを用い, 導入された遺伝子(プロモーターの異なる抗生物質耐性遺伝子)の発現が, カルス, 再分化植物器管等で差異があるか否かを検討した. その結果, 定常的に発現すると考えられているプロモーター(フパリン合成酵素)は, 器官によって発現レベルが異なることを示唆するデーターが得られた. さらに RiプラスミドαT-DNAの中には器官特異的に発現が制御されている遺伝子のあることが判明した.以上のように, 遺伝子の器官特異的発現が明らかになり, 今後の為以下の課題が解決される必要がある. すなわち, (1)組織内部での遺伝子発現の局在性を明らかにする目的でのa in site ハイブリダイゼーション. (1)転写制御因子を知るために, Cis及びTrans acting elementの解析. 前者は, Tiプラスミドベクターによりいくつかのプロモーター領域欠失mutantを植物に導入して調べられる. 後者はプロモーター結合型核タンパクの同定を目的とし, South western法, Foot prints法を用いる必要がある.