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無脊椎動物由来生体防御タンパク質の分子レベルでの異物認識機構の解析

无脊椎动物来源的生物防御蛋白分子水平上的异物识别机制分析

基本信息

批准号：
15019001
负责人：
相沢智康
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15019001/
关键词：
感染症細菌蛋白質微生物 NMR

项目摘要

線虫由来の抗菌ペプチドASABF及びABFについて、そのクローニング及びメタノール代謝酵母を宿主として用いた大量発現系の構築を行い、活性、立体構造に関する解析を進めた。その結果、モデル生物として重要性の高いC.elegansにおいて世界で初めて抗菌ペプチドの同定に成功し、NMR法による立体構造解析を進め、インセクトデフェンシンファミリーと類似性の高いものであることを明らかにした。またカブトガニ由来の抗菌ペプチドであるタキサイチンについて、大腸菌を宿主として用い、インクルージョンボディーからのリフォールディングを行うことで、大量発現系の構築に成功し、安定同位体ラベル試料を調整することで、立体構造と活性の関係について詳細な検討を進めた。その結果、タキサイチンのキチン結合能を有する抗真菌活性発現と電荷が重要である推定される抗グラム陰性、抗グラム陽性活性発現では分子内の異なる部位が重要な役割を果たすことを明らかにした。この他、メタノール代謝酵母を用いた大量発現系により生産した、カイコガ由来リゾチームについてその立体構造解析、安定性解析などをすすめ、ニワトリや哺乳類などの一般的なリゾチームには見られない低温活性などの活性を有すること、またその活性と構造の関連性に関して知見を得たほか、鱗翅目昆虫由来の異物排除に関連する血球活性化因子GBPについて変異体を用いて立体構造と活性に関する研究を展開した。

The analysis of the structure, activity and stereo structure of the host and metabolic yeast for the development of a large number of antibacterial and ABF-derived organisms. As a result, C.elegans has a high degree of importance in the world, and NMR has a high degree of similarity. A detailed discussion of the relationship between the structure and activity of a large number of discovery systems was carried out. As a result, the binding energy of the protein was determined to be important for the development of antifungal activity, and the charge was estimated to be important for the development of antifungal activity. A large number of metabolic yeast production systems, production, production A study on the relationship between the origin of lepidopteran insects and the elimination of foreign substances and the activity of GBP has been carried out.