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リボソーム生合成ファクトリー-rRNA合成からリボソームサブユニット形成まで-

核糖体生物合成工厂——从rRNA合成到核糖体亚基形成——

基本信息

批准号：
15030235
负责人：
水田啓子
金额：
$ 3.65万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

リボソーム生合成はおもに核小体で行われ、rRNAを中心としたネットワークにより、膨大な数の構成成分と調節因子が時空間的に相互作用して超高分子リボソームを作り出している。rRNAの転写、修飾およびプロセシング、蛋白質とのアセンブリ、核小体から核質、さらに細胞質への輸送という複雑な過程を経る。本研究では、rRNA前駆体のプロセシングとリボソームサブユニットアセンブリに関与する調節因子、特にEbp2pとRrs1pについて詳細に解析し、それら因子を介した、rRNAの転写、rRNAのプロセシング、サブユニットの核外輸送など、各反応過程間の連携について解析している。今年度の成果は以下の通りである。(1)EBP2をbaitとして、酵母cDNAライブラリーから、two-hybrid法において相互作用を示す蛋白質をコードする遺伝子を多数取得した。Ebp2は60Sリボソームサブユニットの組立に必要な蛋白質以外に、40Sリボソームサブユニットの組立に必要な蛋白質Yi1019w/Faf1,Utp11,およびリボソーム蛋白質S16とも相互作用することを見出した。この結果から,Ebp2は60S前駆体と40S前駆体に分かれる前の90S前駆体に結合して、2つのサブユニットの協調的な生合成に関わっていることが示唆された(発表論文J.Biol.Chem.279:25353)(2)PCRによりランダムに変異を導入し、rrs1変異株を取得した。rrs1変異株の解析から、Rrs1pが60Sリボソームサブユニットの核外輸送にも必須であることを明らかにした。60Sリボソームサブユニットの組立過程において、核小体における初期の段階から細胞質へと輸送される直前まで、Rrs1が60Sリボソームサブユニットに結合していることを示唆する結果を得た(発表論文FEBS Let 565:106)

The molecular structure of the supramolecular structure is composed of nucleosomes, rRNA centers, molecular components, and regulatory factors. rRNA transcription, modification, protein fragmentation, nucleosome fragmentation, cytoplasmic transport, and recombination In this study, we analyzed the regulatory factors, especially Ebp2p and Rrs1p, related to the regulation of rRNA precursor, the regulation of rRNA precursor, and the This year's achievements are as follows. (1) EBP2 baits, yeast cDNA fragments, two-hybrid methods, interactions, protein expression, and most of the fragments were obtained. Ebp2 60S clear blue screen essential protein for assembly, 40S clear blue screen essential protein for assembly Yi 1019w/Faf1,Utp11, clear blue screen protein S16 interaction The results showed that Ebp2 was involved in the coordinated synthesis of 60S precursor and 40S precursor, and 90S precursor was involved in the synthesis of rrs1 variant.(J. Biol. Chem.279: 25353) Rrs1 is a variant of Rrs1 and Rrs1 p is a variant of Rrs1 and Rrs1 p is a variant of Rrs1. 60S-16S-16S-16