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細胞骨格および液胞による植物の成長軸のモデル解析

利用细胞骨架和液泡的植物生长轴模型分析

基本信息

批准号：
15031209
负责人：
馳澤盛一郎
金额：
$ 3.84万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15031209/
关键词：
微小管液胞 GFP タバコBY-2細胞シロイヌナズナ培養細胞管状要素 TVM SSR

项目摘要

今年度の成果1)タバコBY-2細胞の細胞質分裂に伴う液胞膜系と小胞輸送系の解析本研究では液胞膜の観察系として、GFP-AtVam3pを恒常的に発現するタバコBY-2細胞の形質転換株BY-GV7を確立するとともに、連続光学切片から立体再構築を行なうプログラムSSR(stereo-structure reconstructor)を開発し、M期において分裂装置の周囲にチューブ状の液胞膜の構造TVM(tubular structure of vacuolar membrane)を見出した。スピニングディスクCLSMによる高速撮影より、このTVMは細胞板形成により切断された後、さらに細胞板近傍に集積することが分かった。蛍光色素FM4-64により液胞への膜輸送系を可視化したところ、FM4-64は細胞板に一過的に蓄積し、フラグモプラスト微小管の崩壊後に消失すること、これと並行して、TVMにおけるFM4-64の蛍光が増加することも明らかになった。これらの解析から、細胞板が成熟する過程で使用された液胞膜成分がTVMにより回収されている可能性を示唆した。2)シロイヌナズナ培養細胞の管状要素分化における微小管の機能の解析本研究では、二次壁形成時の微小管の動態を経時観察すべく、GFP-tubulinを恒常的に発現させたシロイヌナズナの懸濁培養細胞AC-GT13を作成し、この細胞を用いて分化率が約30%に達する管状要素の分化誘導系を独自に開発してきた。この実験系における二次壁形成に伴う微小管の経時観察より、二次壁形成に先立って微小管が束化し、形成された二次壁の直下に存在するようになること、二次壁肥厚に伴い、微小管の束は二分して二次壁を挟み込む様に二次壁の縁に沿った位置に移動し、プログラム細胞死が起こる前に微小管束が消失することなどが観察され、二次壁形成を通した微小管の動態が明らかになった。

The results of this year: 1) Analysis of BY-2 cell division with liquid membrane system and small cell transport system in this study. In this study, the cytosol membrane was detected by cell mitosis, the constant BY-2 cell shape was detected by GFP-AtVam3p, the BY-GV7 strain was confirmed to be isolated and linked to optical slices, and the three-dimensional analysis was performed. The SSR (stereo-structure reconstructor) was sequenced. In phase M, TVM (tubular structure of vacuolar membrane) was produced on the plasma membrane of the mitotic apparatus. After the cell plate was cut off, the cell plate was collected and separated from the cell plate after the formation of the cell plate of the high-speed camera, the CLSM camera, the high-speed video camera, the TVM cell plate and the cell plate. The light pigment FM4-liquid cell membrane transport system can be used to change the storage capacity of the FM4-cell board and the microtubule. After the microtubule collapses, the microtubule disappears, the microtubule disappears, and the FM4-cell membrane transport system increases the concentration of light. In the process of cell board maturation, the possibility of using liquid membrane components (TVM) to express the possibility of cell cycle was analyzed. 2) the differentiation of tubular elements in microtubules was analyzed by the mechanism of microtubule formation in this study, the dynamic response of microtubules during the formation of secondary wall, the constant formation of microtubule cells and the formation of microtubule AC-GT13. The cell differentiation rate is about 30%. The differentiation rate of tubular elements is about 30%, and the differentiation rate is about 30%. The formation of the secondary wall is accompanied by the formation of the microtubule, the formation of the secondary wall, the secondary wall, the secondary wall. The microtubule bundle disappears before the cell death, and the secondary wall forms the microtubule dynamic state.