C反応性タンパクのリンパ節転移抑制作用の解明

阐明C反应蛋白对淋巴结转移的抑制作用

• 批准号: 15K20879
• 负责人: 佐々木 智彦
• 金额: $ 1.5万
• 依托单位: Akita University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-01 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15K20879/
• 关键词: C反応性タンパク; 上皮間葉転換; CRP; VEGF; snail; E-cadherin

C反応性タンパク（CRP)による固形癌のリンパ節転移抑制機序に関して、CRPが上皮間葉転換(epithelial-mesenchymal transition: EMT)を抑制すると仮説を立て実験を行った。マウス大腸癌細胞株(MCA-38)培養液にCRP を加えた群とPBSを加えたコントロール群に分け、Wound healing assayを用いて遊走能を比較した。また、C57BL/6Jマウスの背部皮下にMCA-38を移植し，recombinant CRP1μgを3日おきに計9回皮下注射する群(CRP群)と、PBSを同様に投与する群(コントロール群)に分け、EMTに関与する間葉系細胞のマーカー(N-cadherin, E-cadherin)や、シグナル(Snail, SLUG, TWIST, ZEB-1)がどう変化するかを、real time PCR、Western blotting・免疫組織化学染色でそれぞれmRNAおよび蛋白の発現を検討した。その結果、Wound healing assayでは、CRP群で遊走能が抑制された。また、マウス動物実験ではCRP群でZEB-1 mRNAおよびタンパクの発現が有意に抑制されていることが判明した。さらに、N-cadherinの発現が有意に抑制されていた。本研究ではCRP投与によって、ZEB-1とN-cadherinの発現抑制を介した、EMT抑制が起こったことが示唆された。

关于抑制由C反应蛋白（CRP）引起的固体癌中淋巴结转移的机制，我们假设CRP抑制上皮 - 间质转变（EMT）并进行了实验。使用伤口愈合测定法比较了迁移能力，以比较迁移的迁移能力与小鼠结肠癌细胞系（MCA-38）培养基。此外，将MCA-38植入了C57BL/6J小鼠的背皮下区域，每3天皮下注射1μg重组CRP（CRP组）和一个组，其中PBS以相同的方式给予PBS（对照组）。使用实时PCR，Western印迹和免疫组织化学染色检查mRNA和蛋白质的表达，以确定与EMT相关的中充质细胞的标志物（N-钙粘蛋白，E-钙粘蛋白）和信号（N-钙粘蛋白，E-钙粘蛋白）和信号（Snail，Slug，Slug，Twist，Zeb-1）的变化。结果，在伤口愈合测定中，CRP组抑制了迁移能力。此外，在小鼠动物实验中，发现Zeb-1 mRNA和蛋白质的表达在CRP组中得到了显着抑制。此外，N-钙粘着蛋白的表达得到了显着抑制。这项研究表明，通过抑制Zeb-1和N-钙粘蛋白的表达，CRP给药引起了EMT抑制。

项目成果

癌の臨床

癌症临床

• 发表时间: 2011
• 作者: Kamimura K,Suda T,Fukuhara Y,Osaki A;Aoyagi Y.;Suda T;Yokoo K;阿部聡司
• 通讯作者: 阿部聡司

食道癌個別化治療へ向けた新たなリンパ節転移リスク診断 -CRP遺伝子多型診断-

食管癌个体化治疗新的淋巴结转移风险诊断-CRP基因多态性诊断-

• 发表时间: 2015
• 作者: T. Kuwatani;K. Nagata;M. Okada;T. Komai;佐々木智彦
• 通讯作者: 佐々木智彦