転写因子HOXD9が子宮頸部腺癌の悪性形質に関与する分子機構の解明と治療法の開発

转录因子HOXD9参与宫颈腺癌恶性的分子机制的阐明及治疗方法的开发

基本信息

  • 批准号:
    17K16868
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.66万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
  • 财政年份:
    2017
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2017-04-01 至 2019-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

昨年に引き続き、HPV18型陽性の子宮頸癌におけるHOXD9の検討を行った。HOXD9がHPV18型陽性の子宮頸癌に与える分子生物学的影響を検討するため、Hela細胞とSKG1細胞でHOXD9遺伝子を抑制し、E6遺伝子、P53遺伝子およびP53タンパクの発現を検討した。HOXD9を抑制すると2つの細胞株ともに、E6遺伝子発現が著名に抑制され、P53遺伝子の発現は変化なかったが、P53タンパクの発現は増強した。これらのことから、HOXD9はHPV18方型のE6遺伝子の発現を抑制することでP53遺伝子の分解を抑制することが示唆された。HPV18型でのE6/E7遺伝子のプロモーターであるP105プロモーターについて、プロモーーアッセイを実施するため、pGL3-P105プラスミドを作成し、 HPV18型陽性細胞株であるHeLa株およびSKG-I株に導入して、HOXD9によってP105プロモーターが制御されているか検証を行った。HOXD9遺伝子を抑制すると、ルシフェレース活性が顕著に低下し、P105プロモーターが抑制されたことが示唆された。次にHela株を用いたChip assayを行った。actin標識したHOXD9タンパクをHela細胞に導入して強制発現させ、抗actin抗体で沈殿させるとP105プロモーターが沈殿した。このことから、HOXD9はP105プロモーターに直接結合して発現を制御することが判明した。
The study of HPV18 positive cervical cancer was carried out last year. To investigate the molecular biological impact of HOXD9 and HPV18 positive cervical cancer, Hela cells and SKG1 cells on the inhibition of HOXD9 gene, E6 gene, P53 gene and P53 gene expression. HOXD9 gene expression was inhibited in 2 cell lines, E6 gene expression was inhibited in 2 cell lines, P53 gene expression was inhibited in 2 cell lines, P53 gene expression was inhibited in 2 cell lines, and P53 gene expression was enhanced in 2 cell lines. HPV18 and HXD9 gene expression inhibition and P53 gene decomposition inhibition HPV type 18 E6/E7 genes were introduced into HeLa strain and SKG-I strain, and HOXD9 P105 genes were tested. HOXD9 gene suppression, cell activity is low, P105 gene suppression is low. Next, Hela cells were used for Chip assay. When the actin marker was introduced into Hela cells, it was found under stress, anti-actin antibodies were detected, and P105 promo was detected. The HOXD9 is directly connected to the P105.

项目成果

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