Haben KDEl-Cystein-Endopeptidasen als Leitenzyme von Ricinosomen eine Funktion beim Abbau von Zellwandproteinen, um so in der Endphase des Programmierten Zelltodes den Zell-Kollaps zu befördern
作为蓖麻蛋白体的先导酶,KDEl-半胱氨酸内肽酶具有分解细胞壁蛋白的功能,从而在程序性细胞死亡的最后阶段促进细胞崩溃
基本信息
- 批准号:5080802
- 负责人:
- 金额:--
- 依托单位:
- 依托单位国家:德国
- 项目类别:Research Grants
- 财政年份:1998
- 资助国家:德国
- 起止时间:1997-12-31 至 2005-12-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
Aus dem Endosperm keimender Ricinus-Samen wurde eine CysteinPeptidase mit c-terminalem KDEL-Motiv isoliert, die sich als Leitenzym für Ricinosomen erwies. Ricinosomen haben in Ricinus und anderen Pflanzen eine bisher übersehen Funktion als cytosolisches Organell in Pflanzengeweben: sie sind Propetidasespeichernde Organelle, die im End-Stadium der Seneszenz die reife Peptidase entlassen. In Arabidopsis wurden Gene für 3 KDEL-Cystein-Peptidasen identifiziert. Die Promotoren dieser Gene gestatten es, Arabidopsis-Transformanden herzustellen, die das Reportergen für Glucuronidase exprimieren. Diese Transformanden sollen auf die Gewebe- und Zell-spezifische Expression des CEP1- und CEP2- und CEP3-Promotors analysiert werden. Zur Beantwortung der Fragestellung, ob alle 3 Cystein-Peptidasen stets in Ricinosomen lokalisiert sind und ob ihr Auftreten mit Programmiertem Zelltod einzelner Zellen und Gewebe korreliert ist, werden die durch das Reporterprotein identifizierten Organe und Gewebe des Wildtyps näher untersucht. Dies erfolgt einerseits mit spezifischen Antikörpern durch in situ-immunochemische Analyse im Licht- und Elektronen-Mikroskop und andererseits durch in situ-Hybridisierung der mRNA mit Gen-spezifischen Sonden. Die Funktion der 3 CEP-Proteine soll in Knockout-Mutanten untersucht werden, wobei die durch den Knock-out bedingten zellbiologischen Änderungen charakterisiert werden.
蓖麻子胚乳中的半胱氨酸肽酶与 C 末端 KDEL-Motiv 等值,即为蓖麻子体的 Leitenzym。蓖麻油中的蓖麻蛋白体具有 Pflanzengeweben 中细胞溶质细胞器的功能: sie sind Propetidasespeichernde 细胞器,在 End-Stadium der Seneszenz die reife Peptidase entlassen 中。在拟南芥中,基因为 3 KDEL-半胱氨酸-肽酶鉴定。基因启动子、拟南芥转化、葡萄糖醛酸酶实验报告生成。对 CEP1- 和 CEP2- 和 CEP3- 启动子的 Gewebe- 和 Zell-spezifische 表达进行了分析。 Zur Beantwortung der Fragestellung,ob alle 3 Cystein-Peptidasen stets in Ricinosomen lokalisiert sind and ob ihr Auftreten mit Programmiertem Zelltod einzelner Zellen und Gewebe korreliert ist, werden die durch das Reporter Protein identifizierten Organe und Gewebe des Wildtyps näher 下属。在原位免疫化学分析中进行特殊的反渗透和光学显微镜分析,并在 mRNA 的原位杂交中进行特殊分析。 3 CEP-蛋白质的功能在敲除突变中发挥作用,并且在敲除生物学中发挥作用。
项目成果
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