シナプス後部の微細構造と細胞骨格との協調的機能制御

突触后超微结构和细胞骨架之间的协调功能控制

• 批准号: 21240032
• 负责人: 岡部 繁男
• 金额: $ 12.81万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21240032/
• 关键词: シナプス; イメージング; PSD; スパイン; GFP

本研究では新しい光学的測定技術であるStochastic Optical Reconstruction(STORM)法をシナプス後部の分子に適用することで、シナプス内部における分子分布を直接的に可視化することを試みる。この目的の為に、シナプス後肥厚部(PSD)の骨格をつくる蛋白質であるPSD-95に光スイッチとなる分子(Dronpa,EosFP,Dendraなど)を結合した分子プローブを作成し、神経細胞に発現させてSTORM法による可視化が可能であるかどうかを検討した。更に組織内でのシナプスを同様にSTORM法で観察するための技術開発として、水溶性の樹脂に脳組織を包埋し、厚さ1ミクロン程度の切片を作成してSTORM法を適用することを試みた。現時点では予備的な実験であるが、組織内の分子プローブの蛍光強度を維持したまま、厚さ2ミクロン程度の切片を作成し、蛍光観察することが可能となった。

In this study, Stochastic Optical Reconstruction (STORM) method was used to directly visualize the molecular distribution in the posterior part of the body. The purpose of this study is to investigate the possibility of visualizing PSD-95 protein, Dronpa, EosFP, Dendra and other molecules in combination with the STORM method. In addition, the STORM method was used to investigate the technical development of tissue embedding and thickness of water-soluble resin. At present, it is possible to maintain the intensity of fluorescence of molecules in tissues, and to make slices of 2 kinds of tissues.