マウス胎児脳組織における神経前駆細胞の移動様式

小鼠胎儿脑组织中神经祖细胞的迁移模式

• 批准号: 14657002
• 负责人: 岡部 繁男
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657002/
• 关键词: トランスジェニックマウス; GFP; 嗅球; 蛍光顕微鏡法; 神経前駆細胞

マウス胎児脳組織における神経前駆細胞の移動を観察するため、神経前駆細胞に特異的に発現する遺伝子であるT α1 tubulinのpromoterを用いて、オワンクラゲ由来の蛍光蛋白質であるGFPを発現するトランスジェニックマウス系統を作成した。このマウスでは終脳から脊髄に至る神経前駆細胞において強いGFPの発現が胎生10日から15日の間に観察された。この胎児期のマウス嗅球を取り出し、ゲル内で器官培養し、数時間の間に起こる神経前駆細胞の嗅球内での移動をタイムラプス観察した。嗅球内での神経前駆細胞の移動は胎生13日および14日において活発であり、しかもその移動は極めて急速で、かつアメーバ様の運動様式を示した。このような運動はこれまで胎児期の脳組織において観察された事がなく、新しい神経前駆細胞の運動であると考えられる。移動中のGFP陽性細胞を固定し、神経細胞のマーカー分子であるMAP2で染色した所、移動中のGFP陽性細胞はMAP2陽性の神経前駆細胞である事が確認された。また、この神経前駆細胞の運動はアクチン重合阻害剤により抑制され、またカルシウムチャネルの阻害剤により抑制された事から、細胞内カルシウムによるアクチン依存性の細胞運動によっている事が示唆された。今回作成したT α1 tubulin promoterによってGFP分子を発現するトランスジェニックマウスは神経前駆細胞の胎児期脳内での移動様式を研究する上で極めて有用であり、また嗅球全体の器官培養をレーザー顕微鏡によるタイムラプス観察と組み合わせる事により、これまでの脳スライス標本では観察する事の出来なかった神経組織内での細胞移動様式を解析する事が可能になると考えられる。

The gene expression system of T α1 tubulin promoter was established by detecting the migration of neurons in fetal tissues. The expression of GFP was observed from the 10th day to the 15th day after birth. The olfactory bulb is extracted from the fetus, cultured in vitro, and the movement of the neurons in the olfactory bulb is observed at intervals. The movement of the neurons in the olfactory bulb is shown in the movement pattern of the 13th and 14th day of birth. The movement of the fetal tissue is observed in the fetal tissue, and the movement of the new nervous system cells is observed in the fetal tissue. GFP-positive cells in motion were immobilized, MAP2 staining in neurons was confirmed, and GFP-positive cells in motion were MAP2 staining in neurons. In addition, the activities of these neurotrophic cells are inhibited by multiple inhibition factors, and the activities of these neurotrophic cells are inhibited by multiple inhibition factors. This paper reports the development of a T α1 tubulin promoter for the detection of GFP molecules and the study of fetal migration patterns of pre-neurotic cells. It is useful for organ culture of olfactory bulbs as a whole. This is the first time that we have ever seen a cell movement pattern in a brain tissue.

项目成果

Ebihara, T., Kawabata, I., Usui, S., Sobue, K., S.Okabe: "Synchronized formation and remodeling of postsynaptic densities : long-term visualization of hippocampal neurons expressing postsynaptic density proteins tagged with GFP"Journal of Neuroscience. (i

Ebihara, T.、Kawabata, I.、Usui, S.、Sobue, K.、S.Okabe：“突触后密度的同步形成和重塑：表达 GFP 标记的突触后密度蛋白的海马神经元的长期可视化”杂志

Usui, S., Konno, D., Hori, K., Maruoka, H., Okabe, S., K.Sobue.: "Synaptic targeting of PSD-Zip45 (Homer 1 c) and its involvement in the synaptic accumulation of F-actin"Journal of Biological Chemistry. (in press).

Usui, S.、Konno, D.、Hori, K.、Maruoka, H.、Okabe, S.、K.Sobue.：“PSD-Zip45 (Homer 1 c) 的突触靶向及其参与突触积累

Inoue A., S.Okabe: "The dynamic organization of postsynaptic proteins : translocating molecules regulate synaptic function"Current Opinion in Neurobiology. (in press).

Inoue A.，S.Okabe：“突触后蛋白质的动态组织：易位分子调节突触功能”神经生物学的当前观点。

Ebihara, T., Komiya, Y., Izumi-Nakaseko, H., Adachi-Akahane, S., Okabe, S., Okamura, Y.: "Coexpression of a Cav1.2 protein lacking N-terminus and the first domain specifically suppresses L-type calcium channel activity"FEBS Letters. 529. 203-207 (2002)

Ebihara, T.、Komiya, Y.、Izumi-Nakaseko, H.、Adachi-Akahane, S.、Okabe, S.、Okamura, Y.：“缺少 N 末端和第一个结构域的 Cav1.2 蛋白的共表达

Okabe, S.: "Birth, growth, and elimination of a single synapse"Anatomical Science International. 77. 203-210 (2002)

Okabe, S.：“单个突触的诞生、生长和消除”国际解剖科学。